Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im

a b
Abbildung 44. Aufnahme virusanaloger Partikel in C2C12-Zellen nach Inkubation für 1 h (a)
und 2 h (b). Die virusanalogen Partikel sind in rot dargestellt, Zellkerne in grün. Nur ein sehr
geringer Teil der Kapside gelangt in den Zellkern (gelb im Insert).
In allen Zellen wurde eine deutliche Fluoreszenz der Partikel beobachtet, die jedoch in
zellulären Vesikeln angereichert war. Zu keinem Zeitpunkt der Experimente konnten
Kapside im Zytoplasma beobachtet werden, und nur ein sehr geringer Teil befand sich
im Zellkern, einige Partikel wurden jedoch an der Kernmembran beobachtet
(Abbildung 44). Da VP1 ein Kerntranslokationssignal trägt (Chang et al., 1992), sollten
sich die Kapside theoretisch nach Passieren der Zell- oder Vesikelmembran im Zellkern
anreichern. Die Beobachtung, dass die hier verwendeten Partikel nicht in den Zellkern
gelangen zeigt demnach, dass keine effiziente Freisetzung aus den Endosomen erfolgte.
Tabelle 18. Aufnahme von virusanalogen Partikeln in C2C12-Zellen, Mengenabschätzung:
keine Kolokalisation (-), deutliche Kolokalisation (+), sehr starke Kolokalisation (++)
Kapsid Inkubation
VP1-CallS-T248C
oder VP1-3C
15 min
60 min
120 min
20 µm 10 µm
95
Lokalisation der Kapside
Zellkern Zytoplasma Endosomen Lysosomen
—
—
—
—
—
—
+
+
+
—
+
++