æ³Œå°¿ã€ç”Ÿæ®–ã€å† åˆ†æ³Œç³»ç»Ÿ - 国家自然科学基金委员会医学科学部

性 遗 传 性 耳 聋 家 系 中 采 用 全 基 因 组 扫 描 ,SNP 连 锁 分 析 的 方 法 连 锁 分 析 获 得 耳 聋 家 系 相 关基 因 的 定 位 , 分 别 定 位 于 9 号 染 色 体 和 4 号 染 色 体 。 然 后 采 用 全 基 因 组 外 显 子 捕 获 技 术 结 合相 关 基 因 定 位 区 间 内 全 部 基 因 功 能 分 析 , 确 定 DFNB31 基 因 是 一 个 常 显 家 系 的 致 病 基 因 , 其基 因 错 义 突 变 导 致 氨 基 酸 的 改 变 , 通 过 软 件 分 析 确 定 该 突 变 改 变 了 dfnb31 蛋 白 的 空 间 结 构和 激 酶 功 能 。 进 一 步 研 究 突 变 基 因 的 致 聋 机 理 包 括 通 过 免 疫 组 织 化 学 法 检 测 WFS1 基 因 在 鼠耳 蜗 组 织 和 听 觉 中 枢 的 表 达 分 布 , 然 后 分 别 检 测 低 频 遗 传 性 聋 患 者 与 正 常 听 力 者 的 成 纤 维细 胞 中 wolframin 蛋 白 的 含 量 。 通 过 分 析 不 同 突 变 型 WFS1 基 因 编 码 蛋 白 的 稳 定 性 以 及 对 耳蜗 不 同 部 位 细 胞 功 能 的 影 响 , 结 合 临 床 听 力 学 特 点 , 揭 示 突 变 致 遗 传 性 聋 表 型 差 异 的 机制 。 本 研 究 一 方 面 确 定 了 两 个 常 染 色 体 显 性 遗 传 性 耳 聋 家 系 的 致 聋 基 因 , 另 一 方 面 也 揭 示了 WFS1 基 因 异 质 性 突 变 致 遗 传 性 耳 聋 表 型 差 异 的 机 制 。 本 研 究 将 对 进 一 步 研 究 同 一 基 因 不同 突 变 致 不 同 遗 传 表 型 的 致 聋 机 制 研 究 具 有 重 要 的 意 义 。关 键 词 : 遗 传 性 聋 ; 基 因 突 变 ; 蛋 白 ; 机 制学 科 代 码 :H1303发 表 论 著 :[1] Xue J, Li T, Sun X, Liu Y. Focal defect of mastoid bone shell in the region of thetransverse-sigmoid junction: a new cause of pulsatile tinnitus. J Laryngol Otol. 2012;126(4):409-13.[2] 薛 俊 芳 , * 刘 玉 和 . 线 粒 体 脑 肌 病 的 临 床 听 力 学 特 点 . 中 国 听 力 语 言 康 复 科 学 杂 志 . 2011;45(2): 29-31.会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 1 分 组 1培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 0 硕 士 3前 庭 胆 碱 能 传 出 神 经 系 统 在 梅 尼 埃 病 中 的 作 用 及 机 制批 准 号 :30872865项 目 负 责 人 : 孔 维 佳所 在 单 位 : 华 中 科 技 大 学在 本 项 目 资 助 下 , 我 们 应 用 全 细 胞 膜 片 钳 技 术 、 单 细 胞 RT-PCR 技 术 及 离 子 影 像 技 术 检测 新 鲜 单 离 的 豚 鼠 前 庭 终 器 II 型 前 庭 毛 细 胞 上 的 ACh 受 体 通 道 , 通 过 电 生 理 学 和 分 子 生 物学 、 离 子 影 像 实 验 技 术 相 结 合 :(1) 发 现 并 证 实 了 豚 鼠 II 型 前 庭 毛 细 胞 存 在 一 功 能 性 m2 型胆 碱 能 受 体 。 此 受 体 与 细 胞 内 G 蛋 白 相 耦 联 , 通 过 激 动 细 胞 内 Giβ γ 亚 单 位 - 腺 苷 酸 环 化 酶/cAMP-PKA 通 路 介 导 II 型 前 庭 毛 细 胞 表 面 BK 通 道 蛋 白 磷 酸 化 , 引 起 BK 通 道 开 放 , 细 胞 内钾 离 子 外 流 , 导 致 II 型 前 庭 毛 细 胞 超 极 化 ;(2) 进 一 步 我 们 发 现 庆 大 霉 素 (GM) 可 逆 性 、 非竞 争 性 抑 制 豚 鼠 VHCs II 上 ACh- 敏 感 性 BK 电 流 , 并 且 依 赖 于 细 胞 外 钙 离 子 浓 度 , 而 与 细 胞钳 制 电 位 无 关 , 故 推 测 作 用 机 制 可 能 为 GM 与 钙 离 子 竞 争 钙 通 道 使 钙 内 流 减 少 , 进 而 抑 制 BK电 流 ;(3) 我 们 建 立 了 自 身 免 疫 性 内 耳 病 (AIED) 的 动 物 模 型 , 该 模 型 为 研 究 AIED 提 供 了 较为 理 想 的 的 工 具 ;(4) 同 时 , 进 行 了 工 具 酶 作 用 的 研 究 , 为 本 研 究 的 继 续 深 入 奠 定 了 良 好 的基 础 。(5) 我 们 研 究 了 线 粒 体 DNA 缺 失 突 变 在 年 龄 相 关 动 物 及 正 常 动 物 中 的 现 象 及 突 变 机- 273 -