æ³Œå°¿ã€ç”Ÿæ®–ã€å† åˆ†æ³Œç³»ç»Ÿ - 国家自然科学基金委员会医学科学部

项 目 负 责 人 : 富 建 华所 在 单 位 : 中 国 医 科 大 学为 研 究 经 肺 上 皮 钠 水 转 运 在 高 氧 肺 损 伤 早 期 肺 水 肿 阶 段 的 作 用 及 其 机 制 , 本 项 目 在 建立 高 氧 致 肺 损 伤 模 型 基 础 上 , 分 别 以 原 代 培 养 的 肺 泡 Ⅱ 型 上 皮 细 胞 (ATⅡ) 及 A549 细 胞 株为 研 究 对 象 , 应 用 流 式 细 胞 术 、RNA 干 扰 、Real-time PCR、Western-blot、 全 细 胞 膜 片 钳等 分 子 生 物 学 检 测 技 术 , 发 现 随 高 氧 暴 露 时 间 的 延 长 , 水 通 道 蛋 白 -1(AQP1) 基 因 及 蛋 白的 表 达 水 平 逐 渐 下 降 , 采 用 siRNA 转 染 技 术 沉 默 AQP1 基 因 , 证 实 AQP1 是 细 胞 内 外 水 转运 的 重 要 蛋 白 , 但 暴 露 于 高 氧 后 , 与 空 气 组 比 较 ,A549 细 胞 体 积 及 细 胞 渗 透 性 水 通 透 并 没有 差 异 , 表 明 AQP1 并 不 是 导 致 水 转 运 障 碍 的 唯 一 机 制 ; 同 样 在 高 氧 致 CLD 早 期 的 肺 水 肿阶 段 , 钠 通 道 蛋 白 (ENaC) 的 α、β- 及 γ 亚 基 基 因 及 蛋 白 , 特 别 是 β- 及 γ 蛋 白 , 仅 在 高 氧 暴露 初 期 表 达 稍 降 低 , 继 之 显 著 增 加 , 进 一 步 应 用 全 细 胞 膜 片 钳 记 录 全 细 胞 基 础 钠 电 流 , 发现 不 论 是 amiloride 敏 感 性 钠 电 流 , 还 是 非 敏 感 钠 电 流 均 增 加 。 上 述 研 究 表 明 , 在 高 氧 肺 水肿 的 阶 段 , 并 没 有 明 显 的 钠 水 主 动 转 运 障 碍 , 特 别 钠 通 道 的 转 运 功 能 , 不 但 没 有 减 少 , 反而 代 偿 性 的 增 强 , 提 示 经 肺 上 皮 的 钠 水 主 动 转 运 障 碍 并 非 高 氧 肺 水 肿 关 键 机 制 。关 键 词 : 肺 上 皮 细 胞 ; 主 动 转 运 ; 水 通 道 蛋 白 ; 钠 通 道 蛋 白 ; 高 氧学 科 代 码 :H0422发 表 论 著 :[1] 张 慧 , 富 建 华 , 薛 辛 东 . 组 蛋 白 H2AX 在 高 氧 致 肺 损 伤 新 生 大 鼠 肺 组 织 的 表 达 . 解 剖科 学 进 展 . 2011;3:211-214+218.[2] 富 建 华 , 杨 海 萍 , 潘 丽 , 薛 辛 东 , 高 红 .TGF-β1 影 响 肺 成 纤 维 细 胞 结 缔 组 织 生 长 因 子基 因 表 达 的 研 究 . 中 国 当 代 儿 科 杂 志 . 2011;1:36-39.[3] 孙 艳 丽 , 富 建 华 , 薛 辛 东 , 于 晓 岩 . 高 体 积 分 数 氧 致 慢 性 肺 疾 病 新 生 鼠 肺 组 织 骨 形 态 发生 蛋 白 -7 的 动 态 表 达 及 意 义 . 实 用 儿 科 临 床 杂 志 .2010;24:1884-1886.[4] 张 秋 月 , 富 建 华 , 薛 辛 东 . 新 生 鼠 肺 泡 Ⅱ 型 上 皮 细 胞 分 离 培 养 与 鉴 定 . 中 国 新 生 儿 科杂 志 . 2010;6:339-341.[5] 于 晓 岩 , 孙 艳 丽 , 胡 瑜 , 富 建 华 . 高 氧 诱 导 新 生 鼠 肺 纤 维 化 中 CDK2 及 P27 的 表 达 和意 义 . 中 国 医 科 大 学 学 报 . 2010;10:798-802, 2010/[6] 岳 晓 红 , 富 建 华 , 薛 辛 东 . 高 氧 致 慢 性 肺 疾 病 早 产 大 鼠 P16 基 因 启 动 子 区 甲 基 化 . 中 华围 产 医 学 杂 志 . 2011;14(8):463-469.会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 0 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 3 硕 士 2应 用 aCGH 技 术 进 行 胎 儿 畸 形 产 前 遗 传 学 诊 断 的 研 究批 准 号 :30872782项 目 负 责 人 : 许 争 峰所 在 单 位 : 南 京 医 科 大 学- 59 -