L.laetis 一 pMG36e 一 UA 提 高 6、6 倍 。 尿 酸 酶 与 肌 酐 水 解 酶 双 基 因 克 隆 所 构 建 的 基 因 工 程菌 喂 饲 (5/6 肾 切 除 ) 实 验 性 肾 衰 大 鼠 4 周 。 分 解 尿 酸 、 肌 酐 和 硫 酸 吲 哚 酚 前 后 差 值 分 别 为41.96umol/L, 46.23umol/L 和 1.43ug/ml. 均 有 非 常 显 著 性 差 异 P《0.001。 并 保 留 乳 酸 菌 原有 功 能 如 抗 酸 抗 胃 蛋 白 酶 、 抗 胰 蛋 白 酶 、 抑 菌 作 用 、 肠 粘 膜 粘 附 及 降 血 脂 功 能 。 其 遗 传 稳定 性 可 保 持 10 代 。 两 株 基 因 工 程 乳 酸 菌 构 建 成 功 。 为 研 制 安 全 有 效 的 分 解 尿 酸 治 疗 高 尿 酸血 症 和 分 解 多 种 尿 毒 素 治 疗 慢 性 肾 衰 两 种 生 物 制 剂 奠 定 了 基 础 。关 键 词 : 基 因 重 组 ; 细 菌 ; 乳 酸 杆 菌 ; 慢 性 肾 衰 ; 酶学 科 代 码 :H0511发 表 论 著 :[1] 贺 丽 娟 , 蒋 哲 峰 , 蒋 云 生 , 熊 文 , 焦 闻 文 . 乳 酸 菌 对 肠 粘 膜 通 透 性 及 中 小 分 尿 毒 素 清除 的 影 响 . 中 国 血 液 净 化 . 2008;7(2):78-80.[2] 熊 文 , 蒋 哲 峰 , 蒋 云 生 , 贺 丽 娟 . 双 歧 杆 菌 与 乳 酸 杆 菌 在 肾 衰 大 鼠 胃 肠 道 不 同 部 位 的定 植 及 其 对 小 分 子 毒 素 的 分 解 . 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ). 2009;34(1): 35-39.[3] 程 新 , 张 彦 新 , 周 桂 凤 , 蒋 云 生 . 产 肌 酐 水 解 酶 基 因 工 程 菌 的 构 建 . 生 物 医 学 工 程 研究 . 2009;4:299-302.[4] 程 新 , 张 彦 新 , 杨 波 , 刘 栋 , 陈 刚 , 蒋 云 生 . 产 尿 酸 氧 化 酶 基 因 工 程 菌 的 构 建 . 中 南药 学 . 2009;7(6):401-404.会 议 报 告 : 国 际 大 会 1 分 组 1 国 内 大 会 2 分 组 2培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 3 硕 士 4转 化 生 长 因 子 -β1 诱 导 腹 膜 间 皮 细 胞 转 分 化 的 分 子 机 制批 准 号 :30871169项 目 负 责 人 : 刘 伏 友所 在 单 位 : 中 南 大 学长 期 接 受 腹 膜 透 析 的 患 者 可 出 现 腹 膜 透 析 效 能 降 低 , 主 要 表 现 为 腹 膜 超 滤 衰 竭(UFF), 其 原 因 尚 不 完 全 清 楚 , 已 知 TGF-β 1 在 其 中 起 关 键 作 用 。 最 近 研 究 发 现 , 腹 膜 间皮 细 胞 转 分 化 (EMT) 是 UFF 的 始 动 与 可 逆 阶 段 , 因 此 也 是 进 行 干 预 治 疗 的 最 佳 环 节 , 但 EMT的 分 子 机 制 尚 不 明 确 。 本 课 题 采 用 腺 病 毒 /TGF-β 1 诱 导 的 腹 膜 EMT 动 物 模 型 和 体 外 培 养的 大 鼠 腹 膜 间 皮 细 胞 , 使 用 Realtime PCR、Western blot、 免 疫 共 沉 淀 、 激 光 扫 描 显 微 镜等 方 法 , 通 过 观 察 E3 泛 素 连 接 酶 Arkadia、Smurf2 与 Smad7 结 合 降 解 在 其 中 的 调 节 作用 , 深 入 研 究 TGF-β 1 诱 导 腹 膜 间 皮 细 胞 EMT 的 调 控 机 制 。 此 外 , 使 用 miRNA 检 测 技术 , 分 析 miRNA192 对 TGF-β 1 诱 导 的 腹 膜 间 皮 细 胞 EMT 的 调 节 机 制 , 为 阻 断 与 逆 转TGF-β 1 诱 导 的 腹 膜 间 皮 细 胞 EMT 提 供 新 的 理 论 基 础 与 治 疗 靶 点 。关 键 词 : 腹 膜 间 皮 细 胞 ; 转 分 化 ;Arkadia;microRNA学 科 代 码 :H0516发 表 论 著 :- 93 -
[1] 刘 蔚 , 夏 运 成 , 凌 光 辉 , 袁 曙 光 , 彭 佑 铭 , 孙 林 , 刘 伏 友 . 活 性 氧 簇 与 高 糖 腹 透 液 所 致腹 膜 纤 维 化 . 中 国 中 西 医 结 合 肾 病 杂 志 . 2009;10(8):735-737.[2] 邹 莎 琳 , 凌 光 辉 , 夏 运 成 , 袁 曙 光 , 彭 佑 铭 , 孙 林 , 刘 伏 友 . EMT 在 腹 膜 纤 维 化 中 的 作用 及 意 义 . 中 国 中 西 医 结 合 肾 病 杂 志 . 2009;10(7): 645-648.[3] 凌 光 辉 , 朱 雪 婧 , 夏 运 成 , 刘 伏 友 , 彭 佑 铭 , 段 绍 斌 , 刘 虹 , 刘 映 红 , 孙 林 . 葡 萄 糖PDS 对 单 层 人 腹 膜 间 皮 跨 细 胞 电 阻 及 迁 移 修 复 能 力 的 影 响 . 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ).2009;34(5):418-424.[4] 周 循 , 凌 光 辉 , 邹 莎 琳 , 段 绍 斌 , 肖 力 , 孙 林 , 刘 伏 友 . 腹 膜 透 析 流 出 液 中 人 腹 膜 间皮 细 胞 的 培 养 及 转 分 化 特 征 . 中 国 现 代 医 学 杂 志 . 2010;17:2634-2642.会 议 报 告 : 国 际 大 会 1 分 组 0 国 内 大 会 3 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 2 硕 士 1腺 苷 A2A 受 体 对 肾 小 球 免 疫 炎 症 反 应 和 肾 小 球 硬 化 的 调 控 机 理 研 究批 准 号 :30871170项 目 负 责 人 : 申 海 鹰所 在 单 位 : 中 国 人 民 解 放 军 第 三 军 医 大 学肾 间 质 纤 维 化 是 肾 脏 疾 病 进 展 到 终 末 期 肾 功 能 衰 竭 的 最 终 共 同 通 道 。 目 前 肾 间 质 纤 维化 的 治 疗 没 有 特 效 方 法 。 现 有 的 理 论 认 为 , 肾 小 管 上 皮 细 胞 向 间 充 质 细 胞 转 化 (EMT) 在 肾间 质 纤 维 化 的 病 理 过 程 中 , 发 挥 了 最 重 要 的 作 用 。 肾 小 管 上 皮 细 胞 在 多 种 前 纤 维 化 细 胞 因子 (TGF-β 1、CTGF、IL-13) 刺 激 下 , 向 间 充 质 细 胞 转 化 , 细 胞 表 型 改 变 , 表 现 为 表 达 α -平 滑 肌 肌 动 蛋 白 (α -SMA) 的 肌 成 纤 维 细 胞 (MF) 。MF 大 量 生 成 细 胞 外 基 质 , 导 致 肾 间 质 纤维 化 的 发 生 。 而 单 核 巨 噬 细 胞 分 泌 的 TGF-β 1 是 诱 导 EMT 发 生 的 最 重 要 因 子 。 我 们 前 期 关 于腺 苷 A2AR 与 肾 小 球 肾 炎 的 实 验 表 明 , 激 活 腺 苷 A2AR 可 以 显 著 抑 制 大 鼠 肾 小 球 肾 炎 模 型 中 单核 巨 噬 细 胞 的 聚 集 。 那 么 激 活 腺 苷 A2AR 导 致 的 单 核 巨 噬 细 胞 聚 集 减 少 , 能 否 继 而 抑 制 TGFβ1 诱 导 的 EMT 的 发 生 , 减 少 细 胞 外 基 质 的 产 生 , 从 而 减 缓 或 抑 制 肾 间 质 纤 维 化 的 进 程 。 基于 以 上 预 实 验 结 果 及 理 论 基 础 , 我 们 使 用 A2AR 敲 除 小 鼠 , 建 立 了 两 种 小 鼠 肾 纤 维 化 模 型 ,通 过 药 理 学 实 验 , 证 实 了 , 激 活 A2AR 可 以 明 显 减 轻 肾 间 质 纤 维 化 程 度 , 其 机 制 可 能 为 激 活A2AR 抑 制 了 单 核 巨 噬 细 胞 的 聚 集 , 继 而 抑 制 TGF-β 1 诱 导 的 EMT 的 发 生 。关 键 词 : 肾 间 质 纤 维 化 ; 单 核 细 胞 ; 腺 苷 A2A 受 体 ; 敲 除学 科 代 码 :H0509发 表 论 著 :会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 1 分 组 1培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 1 硕 士 0血 液 净 化 局 部 枸 橼 酸 抗 凝 对 血 液 单 个 核 细 胞 钙 瞬 态 及 炎 症 反 应 的 影 响 机 制批 准 号 :30871171- 94 -
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将 为 解 决 临 床 胰 岛 细
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的 调 控 作 用 。 申 请 者
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中 menin 的 表 达 缺 失 会
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细 胞 。 我 们 的 前 期 研
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黏 膜 炎 性 病 变 演 进 的
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[1] Zhu M, Fu QJ, Galvin JJ 3rd, Ji
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糖 皮 质 激 素 受 体 对 慢
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羊 膜 来 源 SP 细 胞 诱 导
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疫 反 应 和 调 控 DSPP 基
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又 反 映 了 局 部 炎 症 等
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