æ³Œå°¿ã€ç”Ÿæ®–ã€å† åˆ†æ³Œç³»ç»Ÿ - 国家自然科学基金委员会医学科学部

批 准 号 :30872868项 目 负 责 人 : 扈 英 伟所 在 单 位 : 山 东 大 学炎 症 时 T 细 胞 被 激 活 , 通 过 释 放 众 多 因 子 调 控 破 骨 细 胞 性 骨 吸 收 , 这 些 因 子 或 促 进 骨吸 收 或 抑 制 骨 吸 收 。Th1 细 胞 来 源 的 IFNg 及 Th2 来 源 的 IL-4 在 体 外 抑 制 骨 吸 收 , 分 别 与RANKL 或 LPS 联 合 应 用 诱 导 小 鼠 RAW264.7, 通 过 TRAP 染 色 、PCR 及 Western blot 检 测 mRNA表 达 及 蛋 白 水 平 , 结 果 提 示 ,IL-4 驱 动 LPS 诱 导 的 细 胞 朝 破 骨 细 胞 方 向 分 化 , 而 IFNg 及IL-4 皆 抑 制 RANKL 的 破 骨 细 胞 生 成 作 用 , 促 进 细 胞 表 达 巨 噬 细 胞 的 特 性 , 进 一 步 的 吞 噬 试验 和 骨 吸 收 实 验 也 显 示 出 上 述 趋 势 。IP3 受 体 (IP3R) 是 钙 振 荡 形 成 的 主 要 钙 离 子 通 道 , 而 钙 振 荡 在 破 骨 细 胞 前 体 细 胞 分 化过 程 中 有 重 要 意 义 。 在 破 骨 细 胞 前 体 细 胞 分 化 过 程 中 ,IP3R 表 达 增 加 。TNFα 可 明 显 增 强骨 髓 来 源 单 核 细 胞 中 IP3 受 体 亚 型 I(IP3R1) 的 表 达 。 磷 脂 酰 胆 碱 特 异 性 磷 脂 酶 C(PC-PLC)特 异 性 抑 制 剂 D609 抑 制 了 TNFα 对 IP3R1 的 上 调 作 用 , 同 时 消 除 了 TNFα 对 破 骨 细 胞 生 成 的影 响 。 上 述 结 果 提 示 TNFα 可 能 通 过 活 化 PC-PLC, 促 进 IP3R1 的 表 达 , 以 增 强 破 骨 前 体 细 胞中 钙 离 子 震 荡 , 最 终 促 进 RANKL 诱 导 的 破 骨 细 胞 生 成 。关 键 词 : 骨 吸 收 ; 破 骨 细 胞 ;IL-4; IP3R; 磷 脂 酰 胆 碱 特 异 性 磷 脂 酶 C学 科 代 码 :H1402发 表 论 著 : 无会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 1 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 1 硕 士 1TLR9 信 号 途 径 在 成 牙 本 质 细 胞 天 然 免 疫 反 应 及DSPP 基 因 表 达 调 控 中 作 用 的 研 究批 准 号 :30872869项 目 负 责 人 : 何 文 喜所 在 单 位 : 中 国 人 民 解 放 军 第 四 军 医 大 学成 牙 本 质 细 胞 是 牙 髓 最 先 接 触 细 菌 微 生 物 的 细 胞 。TLR9 是 细 菌 DNA 的 天 然 免 疫 受 体 ,参 与 细 胞 天 然 免 疫 反 应 。DSPP 是 牙 本 质 形 成 和 矿 化 中 的 关 键 分 子 。 为 了 验 证 TLR9 参 与 成牙 本 质 细 胞 天 然 免 疫 反 应 并 调 控 DSPP 基 因 表 达 的 假 说 , 本 项 目 通 过 分 子 生 物 学 手 段 证 实 成牙 本 质 细 胞 表 达 TLR9, 可 与 细 胞 外 特 异 性 配 体 CpG DNA 结 合 , 启 动 下 游 的 MyD88 信 号 途 径 ,激 活 NF-κ B 和 MAPK 信 号 途 径 ( 含 ERK,P38 和 JNK MAPK), 活 化 NF-κ B 和 AP-1 转 录 因 子 ,进 而 调 控 下 游 炎 性 细 胞 因 子 和 矿 化 相 关 基 因 ( 含 DSPP 基 因 ) 的 表 达 , 其 中 NF-κ B 信 号 途 径参 与 所 有 靶 基 因 的 调 控 , 而 MAPK 信 号 途 径 则 针 对 靶 基 因 不 同 有 较 大 差 异 。 另 外 , 利 用 染 色质 共 沉 淀 (Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 对 TLR9 信 号 途 径 在 DSPP 基 因 启 动 子 上转 录 因 子 NF-κ B 和 AP-1 的 结 合 位 点 进 行 定 位 。 研 究 初 步 阐 明 了 TLR9 介 导 成 牙 本 质 细 胞 免- 286 -