æ³Œå°¿ã€ç”Ÿæ®–ã€å† åˆ†æ³Œç³»ç»Ÿ - 国家自然科学基金委员会医学科学部

上 的 1 细 胞 受 精 卵 发 生 异 常 卵 裂 , 正 常 受 精 率 大 大 降 低 。 本 课 题 通 过 RNA 干 扰 方 法 , 结 合精 原 干 细 胞 转 染 / 卵 胞 浆 内 单 精 子 注 射 (ICSI) 技 术 , 建 立 了 转 ssp311 基 因 RNA 干 扰 小 鼠 模型 , 使 得 F1 代 sp3111 基 因 的 体 内 干 扰 效 率 达 到 30% 以 上 , 该 转 基 因 小 鼠 的 体 内 RNA 干 扰效 率 能 稳 定 传 代 至 第 5 代 。 借 助 已 建 立 的 sp3111 RNA 干 扰 小 鼠 模 型 , 我 们 发 现 小 鼠 精 子 sp3111 基 因 敲 低 表 达 30% 后 , 雄 性 小 鼠 与 野 生 雌 性 小 鼠 自 然 交 配 后 的 产 仔 率 显 著 降 低 ; 小 鼠成 熟 精 子 的 活 动 率 虽 然 没 有 显 著 变 化 , 但 体 外 受 精 率 却 显 著 降 低 , 动 物 模 型 得 到 的 结 果 与抗 SP3111 抗 体 封 闭 精 子 后 的 体 外 受 精 率 降 低 的 结 果 完 全 一 致 。 通 过 本 项 目 研 究 , 我 们 建 立了 转 基 因 RNA 干 扰 小 鼠 模 型 的 技 术 平 台 , 并 且 通 过 转 sp3111 基 因 RNA 干 扰 动 物 模 型 , 发现 抑 制 sp3111 基 因 的 表 达 不 会 影 响 精 子 的 发 生 和 成 熟 , 但 会 干 扰 精 子 与 卵 子 的 正 常 受 精 并导 致 胚 胎 异 常 卵 裂 。关 键 词 :SP3111, 转 基 因 RNA 干 扰 小 鼠 , 体 外 受 精学 科 代 码 :H0417发 表 论 著 :[1] Wei li Shi, Ting yan Shi, Zhe yu Chen, Ju fang Lin, Xiao feng Jia, Jian Wang, Huijuan Shi. Generation of sp3111 transgenic RNAi mice via permanent integration of small hairpin RNAs in repopulating spermatogonial cells in vivo. Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2010;42(2):116-121.[2] 宋 丽 伟 , 史 庭 燕 , 林 菊 芳 , 李 翀 , 袁 瑶 , 欧 伶 , 施 惠 . 低 浓 度 NaOH 对 ICSI 前 小 鼠 精 子DNA 完 整 性 的 影 响 . 实 验 动 物 与 比 较 医 学 , 2010;30(2):82-86.[3] 贾 晓 峰 、 周 密 、 林 菊 芳 、 时 伟 丽 , 张 晓 东 , 施 惠 娟 . 生 殖 细 胞 特 异 表 达 蛋 白 sp3111 在 受精 及 早 期 胚 胎 发 育 中 的 作 用 . 中 华 男 科 学 杂 志 , 2010; 16(1):14-19.[4] 林 菊 芳 , 贾 晓 峰 , 宋 丽 伟 , 周 宇 荀 , 赵 健 , 施 惠 娟 . 重 组 表 达 SOD 对 野 生 小 鼠 精 子 的 冷冻 保 护 作 用 . 实 验 动 物 与 比 较 医 学 ,2010; 30(2):100-104.[5] Zhi hong Niu, Xue feng Huang, Xiao feng Jia, Jufen Zheng, Yao Yuan, Ting yan Shi,Hua Diao, He guo Yu, Fei Sun, Hui qing zhang, Hui juan Shi, Yun Feng. A spermviability test using SYBR-14/propidium iodide flow cytometry as a tool for rapid screening of primary ciliary dyskinesia patients and for choosing sperm sources for intracytoplasmic sperm injection. Fertility & Stertility, 2011; 95(1):389-92.[6] 华 叶 , 贾 晓 峰 , 华 敏 敏 , 袁 瑶 , 范 立 强 , 施 惠 娟 . sp3111 RNAi 转 基 因 小 鼠 模 型 的 评 价 以及 sp3111 下 调 表 达 对 受 精 及 早 胚 发 育 的 影 响 . 实 验 动 物 与 比 较 医 学 , 2011;31(2):83-86.[7] 王 会 , 刘 玉 林 , 徐 彦 , 王 鹏 , 施 惠 娟 , 冯 云 . 中 国 人 群 AZFc 微 缺 失 区 域 序 列 标 签 位 点的 探 讨 . 中 华 男 科 学 杂 志 , 2011; 17(5):391-395.[8] Qing Wu, Guo wu Chen, Tao fei Yan, Hui Wang, Yu ling Liu, Zheng Li , Shi weiDuan, Fei Sun, Yun Feng, Hui juan Shi. Prevalent false positives of azoospermia factor a (AZFa) microdeletions contributed by single nucleotide polymorphism rs72609647in the sY84 screening of male infertility. Ascian Journal of Andrology, 2011; 13:877-880.会 议 报 告 : 国 际 大 会 1 分 组 1 国 内 大 会 1 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 0 硕 士 6- 46 -