Rezümékötet 2008. - vmtdk

More documents

Recommendations

Info

46 É L Õ T E R M É S Z E T T U D O M Á N Y O K A DMPK GÉNBEN TALÁHATÓ CTG EXPANZIÓ AZONOSÍTÁSA MIOTÓNIÁS IZOMDISZTRÓFIÁBAN SZENVEDÕ BETEGEKNÉL „TRIPLET-PRIMED” PCR SEGÍTSÉGÉVEL Szerzõ: RADVÁNSZKÝ János 1 , BATOVÁ Monika 2 , REŠKO Péter 1 , PÁLFFY Roland 3 doktorandusz, III. évfolyam Témavezetõ: Doc. RNDr. KÁDAŠI Lajos, PhD.1 Intézmény: 1 Comenius Egyetem, Természettudományi Kar, Molekuláris Biológia Tanszék, Pozsony, Szlovákia 2 Comenius Egyetem, Természettudományi Kar, Mikrobiológia és Virológia Tanszék, Pozsony, Szlovákia 3 Comenius Egyetem, Orvostudományi Kar, Patofiziológiai Intézet, Pozsony, Szlovákia Az öröklõdõ progresszív izomdisztrófiák egyik típusa az úgynevezett miotóniás izomdisztrófia (dystrophia myotonica), melyhez a DMPK (Dystrophia Myotonica Protein Kinase) génben található CTG ismétlõdések expanziója vezet. Ezen ismétlõdések száma mind az egészséges, mind a mutáns allélok esetében is magasan variábilis. Az egészséges allélok nagysága 5 és 37 ismétlõdés között található, míg a betegséget kiváltó allélok 50-tõl több ezer CTG ismétlõdést tartalmazhatnak. A DNS-vizsgálat nagy fontossággal bír, mivel nemcsak a betegség fellépésének ideje változó, de a tünetegyüttes is gyakran fedi egymást egyéb neuromuszkuláris rendellenességekkel. Az expandált CTG ismétlõdések szokatlan másodlagos szerkezete viszont erõs kihívást jelent a legtöbb PCR alapú DNS diagnosztikai metódus esetében. A bemutatott dolgozat egy két lépésbõl álló metódust mutat be a fönt leírt expanziók azonosítására. Az elsõ lépésben a CTG ismétlõdések számát klasszikus PCR segítségével határoztuk meg. Az olyan problematikus minták esetében, melyekben csak egy allélt azonosítottak (a páciens homozigóta ezen lokuszra nézve, vagy heterozigóta, mely egy amplifikálható allélt és egy expandált hordoz, nem amplifikálható allélt), a DNS-mintát egy következõ metódus, az úgynevezett „Triplet-Primed” PCR (TP-PCR) segítségével vizsgáljuk tovább. A bemutatott dolgozat során a CTG ismétlõdések nagyságát 38 miotóniás izomdisztrófiagyanús páciens és 103 egészséges kontrollegyén DNS mintájában vizsgáltuk a felvázolt kétlépéses metódus felhasználásával. Az egészséges allélok vizsgálata trimodális disztribúciót mutatott, miközben a kromoszómák többsége a (CTG) 5 és (CTG) 9-17 csoportokba tartozott. A miotóniás izomdisztrófiagyanús páciensek mintái között 8 esetben támasztottuk alá a CTG expanzió jelenlétét. Kulcsszavak: CTG ismétlõdés, DM1, Dystrophia Mytonica Protein Kinase, miotóniás izomdisztrófia, TP-PCR, Triplet- Primed PCR V I I . V A J D A S Á G I M A G Y A R T U D O M Á
É L Õ T E R M É S Z E T T U D O M Á N Y O K IDENTIFICATION OF EXPANDED DMPK ALLELES IN PATIENTS WITH MYOTONIC DYSTROPHY TYPE 1 WITH THE USE OF TRIPLET-PRIMED PCR Author: János RADVÁNSZKÝ 1 , Monika BATOVÁ 2 , Péter REŠKO 1 , Roland PÁLFFY 3 3 rd year of postgradual studies Supervisor: Doc. RNDr. Lajos KÁDASI, PhD.1 Institution: 1 Comenius University, Faculty of Natural Sciences, Department of Molecular Biology, Bratislava, Slovak Republic 2 Comenius University, Faculty of Natural Sciences, Department of Microbiology and Virology, Bratislava, Slovak Republic 3 Comenius University, Faculty of Medicine, Institute of Pathophysiology, Bratislava, Slovak Republic Myotonic dystrophy type 1 (DM1) is a neuromuscular disorder caused by a CTG trinucleotide expansion in the Dystrophia Mytonica Protein Kinase gene (DMPK). This repeat is highly polymorphic both in healthy and in affected individuals. Healthy alleles are in a range of 5 to 37 CTG repeats. The disease causing CTG expansion can vary from 50 to several thousand repeats in affected individuals. DNA testing is important for the diagnosis of this disease because clinical discrimination is complicated by its late onset and frequently overlapping symptomatology with other neuromuscular diseases. However unusual secondary structures of the expanded CTG repeat regions poses a challenge for PCR based diagnostic methods. Our work describes a two-step procedure for detection of unstable alleles causing myotonic dystrophy type 1. At first the repeat lengths are examined by standard PCR and those problematic samples, were only one allele is detected (homozygous sample for this allele or heterozygous sample with one amplifiable and one non-amplifiable, expanded allele) are further analysed by Triplet-Primed PCR (TP-PCR). CTG repeat length was analysed in samples of 38 suspected patients and in 103 samples of healthy, unrelated individuals both by standard PCR and by TP-PCR. Both types of these reactions were carried out with fluorescent labelled primers and the results were analysed using fragment analysis in genetic analyser. Analysis of the repeat length in healthy samples showed trimodal distribution with the majority of chromosomes belonging to the groups (CTG) 5 and (CTG) 9-17. Among samples of suspected patients expanded allele was detected in 8 cases. Keywords: CTG repeat, DM1, Dystrophia Mytonica Protein Kinase, myotonic dystrophy type 1, TP-PCR, trinucleotide expansion, Triplet-Primed PCR N Y O S D I Á K K Ö R I K O N F E R E N C I A 47
Page 1 and 2: 7. Vajdasági Magyar Tudományos Di
Page 7 and 8: R É S Z L E T E S P R O G R A M 19
Page 9 and 10: 14.15-14.30 . . . . Száraz Áron (
Page 11 and 12: 16.45-17.00 . . . . S z ü n e t R
Page 13 and 14: M Û V É S Z E T E K Szekcióvezet
Page 15 and 16: ELÕSZÓ A 7. Vajdasági Magyar Tud
Page 17 and 18: A TDK-DOLGOZATOK ÖSSZEFOGLALÓI N
Page 19 and 20: P L E N Á R I S T U D O M Á N Y O
Page 31 and 32: É L Õ T E R M É S Z E T T U D O
Page 45: É L Õ T E R M É S Z E T T U D O
Page 59 and 60: É L E T T E L E N T E R M É S Z E
Page 97 and 98:
É L E T T E L E N T E R M É S Z E
Page 99 and 100:
Page 101 and 102:
Page 103 and 104:
T Á R S A D A L O M T U D O M Á N
Page 105 and 106:
Page 107 and 108:
Page 109 and 110:
Page 111 and 112:
Page 113 and 114:
Page 115 and 116:
Page 117 and 118:
Page 119 and 120:
Page 121 and 122:
Page 123 and 124:
Page 125 and 126:
Page 127 and 128:
Page 129 and 130:
Page 131 and 132:
Page 133 and 134:
Page 135 and 136:
Page 137 and 138:
Page 139 and 140:
Page 141 and 142:
Page 143 and 144:
Page 145 and 146:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K Thi
Page 147 and 148:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K The
Page 149 and 150:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K A T
Page 151 and 152:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K A Z
Page 153 and 154:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K MUZ
Page 155 and 156:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K AZ
Page 157 and 158:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K NÕ
Page 159 and 160:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K AZ
Page 161 and 162:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K LOV
Page 163 and 164:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K TUM
Page 165 and 166:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K SEM
Page 167 and 168:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K the
Page 169 and 170:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K der
Page 171 and 172:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K nor
Page 173 and 174:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K ADA
Page 175 and 176:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K A K
Page 177 and 178:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K A M
Page 179 and 180:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K SZE
Page 181 and 182:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K LJU
Page 183 and 184:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K COS
Page 185 and 186:
H U M Á N T U D O M Á N Y O K VAL
Page 187 and 188:
M Û V É S Z E T E K JELFOLYAM (az
Page 189 and 190:
M Û V É S Z E T E K A NEMLÉT MIN
Page 191 and 192:
M Û V É S Z E T E K JEGYZETEK Sze
Page 193 and 194:
M Û V É S Z E T E K Techniques li
Page 195 and 196:
M Û V É S Z E T E K HANGVERSENY F
Page 197 and 198:
M Û V É S Z E T E K HALLUCINÁLOK
Page 199 and 200:
M Û V É S Z E T E K NEVESTA NOÆI
Page 201 and 202:
N Y O S D I Á K K Ö R I K O N F E
Page 203 and 204:
A VII. VMTDK-án AZ ALÁBBI FELSÕO
Page 205 and 206:
A V I I . V M T D K T U D O M Á N
Page 207 and 208:
V É D N Ö K E I N K : Tartományi
Page 209 and 210:
T A R T A L O M SÁGI Andor (Újvid
Page 211 and 212:
TÁRSADALOMTUDOMÁNYOK T A R T A L
Page 213 and 214:
BALOGH AUER N. Zita (Pécs) Az újr
Page 215 and 216:
7. Vajdasági Magyar Tudományos Di
show all

Rezümékötet 2008. - vmtdk

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?