manual de toxicología clínica - Derecho Penal en la Red

eritrocitaria no sólo tiene función diagnóstica, sino que sirve para monitorear el
tratamiento y conocer el riesgo al que se expone quien deba relacionarse con estos
productos.
La colinesterasa sérica, por el contrario, depende mucho de la integridad del
parénquima hepático y del individuo y es más un índice de absorción antes que una
lesión tóxica, aunque puede ser de mayor utilidad si se tiene un valor de
preexposición. Entonces la determinación de ambas permite discriminar entre
hepatopatías e intoxicaciones por fosforados.
La acetilcolinesterasa eritrocitaria puede medirse al separar los hematíes, lavarlos
con solución fisiológica y hemolizarlos en buffer de pH 8.4. Luego se agrega
acetilcolina y se ve la disminución de pH provocada por la aparición del ácido
acético en ese medio tamponado al cabo de un tiempo determinado.
El plasma/suero es la elección en otras situaciones, ya que se encuentra presente
la droga de origen y su nivel está relacionado con el daño, aunque la interferencia
por sustancias endógenas es mayor que en la orina. Se deja de lado la alcoholemia
(las particularidades de cuya extracción serán analizadas luego) se aconseja
extraer 10 mL en un tubo con heparina o EDTA. El uso de anticoagulantes como la
heparina es necesario, porque se ha demostrado en estudios realizados en
TOXIMED que los eritrocitos hemolisados interfieren en estas determinaciones
bioquímicas.
Cuando el estudio químico analítico toxicológico va a ser dirigido a la búsqueda de
tóxicos orgánicos volátiles (metanol, etanol, acetona, etc.) la muestra tomada debe
ocupar todo el volumen del recipiente porque si se deja una capa de aire, el tóxico
orgánico volátil que está presente en la muestra biológica puede ocupar dicha capa
y cuando se destape el frasco salga al exterior y ocurran pérdidas significativas del
tóxico que se quiere determinar.
Para la determinación de etanol en sangre no debe emplearse alcohol como
desinfectante, ni otras sustancias reductoras si se usa el método de difusión,
porque interfieren en la determinación, así que la desinfección debe ser realizada
con solución jabonosa, cloruro mercúrico. Se puede utilizar sangre con citrato,
EDTA, heparina u oxalato, pero si se emplea el método del alcohol deshidrogenasa
se debe considerar que el fluoruro de sodio, que es un conservante, al mismo
tiempo es un inhibidor enzimático que afecta el alcohol deshidrogenasa. Debe
anotarse la hora de extracción y para que no haya generación de alcohol por
fermentación de los microorganismos las muestras se conservarán en –20 °C.
Para la determinación de etanol hay diferentes métodos entre los que están el de
difusión y el enzimático. El método de difusión consiste en colocar K 2 CO 3 en el
compartimiento externo de una cámara de Comway , en el medio K 2 CO 3 y la
muestra de sangre, en el interior K 2 Cr 2 O 7 , y luego de un tiempo 2 horas a 50º el
etanol pasa a ácido acético por oxidación y el Cr 6+ a Cr 3+ , que se titula con
iodo/tiosulfato.
Este método, si bien es económico, presenta interferencias por otros reductores y
además es lento y laborioso, ya que demanda por lo menos dos horas de
incubación y la necesidad de efectuar una titulación (cuyo punto final es subjetivo,
algo crítico en una determinación tan delicada) por lo que no se aconseja su
empleo. Otro método es el que se basa en que el alcohol deshidrogenasa cataliza
la conversión:
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