porphyrines et chlorines polyaminées et trimères - Epublications ...

4- Coefficient de partage
Les coefficients de partition des produits déprotégés (12a,b - 13a,b - 14a,b et 15a,b) sont
déterminés à 25°C dans un mélange 1-octanol/ eau. 3.10 -4 mol de chaque produit sont
solubilisés dans un milieu composé à volume égal d’eau (3 mL) et de 1-octanol (3 mL). Le
milieu est agité vigoureusement puis centrifugé. 100 µL de chaque phase, organique et
aqueuse, sont prélevés et dilués séparément dans 2 mL de méthanol. La concentration finale
de chaque phase est déterminée par absorption UV-visible.
5- Appareillage pour la production d’oxygène singulet
Le système est constitué d’un bain themostaté à 20°C dans lequel est inséré un tube à
hémolyse contenant l’échantillon étudié à une concentration d’environ 10 -5 M. L’ensemble est
maintenu sous bullage d’air comprimé et sous un éclairage fourni par deux lampes de 100 W.
Les résultats des tests de production d’oxygène singulet réalisés sur les composés polyaminés
synthétisés sont qualitativement comparés par chromatographie sur couche mince à ceux
obtenus pour l’hématoporphyrine qui est un producteur reconnu d’oxygène singulet. Au cours
de ces essais, l’acétate d’ergostérol est utilisé comme accepteur d’oxygène singulet afin de
former l’endoperoxyde d’acétate d’ergostérol. L’analyse des produits formés met en évidence,
après quinze minutes d’irradiation, la présence de l’endoperoxyde et donc la formation
d’oxygène singulet pour tous les macrocycles testés.
6- Interactions avec l’ADN
La préparation des solutions des composés 12a,b – 13a,b -14a,b et 15a,b ainsi que la solution
d’ADN (ADN plasmidial de thymus de veau, Invitrogen) est réalisée à l’aide d’une solution
saline de tampon phosphate pH 7,4 (Sigma). La concentration des solutions de chaque
composé est environ de 2.10 -5 M tandis que la concentration de la solution mère d’ADN est
ajustée à 1,2.10 -4 M (sur la base de la masse moyenne d’une paire de nucléotides
complémentaires, soit 660 Da). La formation de complexes macrocycle-ADN est observée par
spectroscopie UV-visible après additions successives de la solution d’ADN (le rapport
[ADN]/[macrocycle] varie de 0,2 à 3,6).
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