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Target ein sehr kleines Signal nachweisbar war. Das Signal unterschied sich vom
Grundrauschen allerdings nur geringfügig.
Der Vergleich von komplementären und nicht komplementären Dabcyl-markierten
Targets erfolgte durch den Einsatz von 2 Sonden mit verschiedenen Sequenzen und
einem Target. Die Untersuchung wuren nach einer 10 minütigen Hybridisierung in
800 nM Target bei der komplementären Sonde und 30 min Hybridisierung bei der
nichtkomplementären Sonde durchgeführt. Die Oberflächenbelegung wurde vorher
mittels Chronocoulometrie überprüft. Dabei konnte festgestellt werden das sich die
beiden Sonden in diesem Punkt nicht voneinander unterschieden.
Abb. 5.32: Einfluß von komplementären und nichtkomplementären Nukleinsäuren auf
Signal. Messungen bei Raumtemperatur in TRIS-Puffer pH 7,5. Grundlinie der
FRIZ-Sonde (a), 15 min Hybridisierung mit 0,8 µM komplementären Dabcyl-
Target (b), Grundlinie der EcoR-Sonde (c), 30 min Hybridisierung von EcoR mit
0,8 µM Dabcyl-Target (d)
In der Abbildung 5.31 sind die Grundlinie, dass heißt das Signal in reinen 10 mM
TRIS Puffer mit 0,5 M Natriumsulfat pH 7,5, der komplementären Sonde (a), das
Hybridisierungssignal der komplementäre Sonde mit 800 nM Dabcyltarget nach
15 min (b), die Grundlinie für die nichtkomplementäre Sonde (c) und das Signal
nach 30 min Hybridisierung für das nichtkomplementäre Nukleinsäurepaar (d) dargestellt.
Diese Versuche zeigen, dass sowohl die direkt heizbare Drahtelektrode, als auch die
verwendeten Sonden und Targets für einen selektiven Nachweis der komplementären
Nukleinsäuren geeignet sind.
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