Archivserver der Deutschen Nationalbibliothek
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4.4.1 Modifizierung des Targets mit Osmiumtetroxid-Bipyridin<br />
Grundlage dieser Markierung ist die Reaktion von Osmium(IV)-Komplexen tertiärer<br />
Amine, wie z. B. Pyridin, Bipyridin, Phenanthrolin o<strong>der</strong> TEMED, mit Thymin- o<strong>der</strong><br />
Cytosinbasen 150 . Von diesen Substanzen ist das Phenanthrolin nicht geeignet, da es<br />
für die Reaktion am Einzelstrang nicht spezifisch ist. Diese von Palecek entwickelte<br />
Markierungstechnik wurde in unsere Arbeitsgruppe von Dr. Flechsig und Hr. Reske<br />
verbessert, untersucht und patentiert 58,151 .<br />
Durch den Einsatz eines sogenannten Schutzstranges, dass bedeutet eines Nukleinsäureoligomers<br />
mit einigen Basenfehlpaarungen, wurde nur <strong>der</strong> endständige Teil des<br />
nachzuweisenden Stranges markiert. In unserem Fall handelte es sich um eine<br />
Sequenz von fünf Thymidin-Resten hintereinan<strong>der</strong>. Dadurch konnte eine Mehrfachmarkierung<br />
relativ leicht erreicht werden.<br />
Abb. 4.5: Schematische Darstellung <strong>der</strong> Markierung und für unsere Anwendung geeigneten<br />
Liganden.<br />
Diese mehrfache Markierung wie<strong>der</strong>um führt zu einer sehr hohen Signalausbeute.<br />
Aus diesem Grund wurden für die weiteren Versuche zum Vergleich von RDE und<br />
LTCC-Elektrode, sowie zum Einfluss <strong>der</strong> Konvektion auf das Signal diese Targets<br />
eingesetzt.<br />
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