Archivserver der Deutschen Nationalbibliothek
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5.2.2 Optimierung<br />
Während <strong>der</strong> Arbeiten zum Einfluss von Konvektion und Temperatur auf das Hybridisierungssignal<br />
konnte ursprünglich keine reproduzierbare Signalstabilität erreicht<br />
werden. Aus diesem Grund wurden neben <strong>der</strong> zuerst eingesetzten Immobilisierungsmethode<br />
Standard zwei weitere Varianten mit <strong>der</strong> Monothiol-Sonde getestet.<br />
Abb. 5.5: Vergleich <strong>der</strong> Oberflächenbelegung <strong>der</strong> einzelnen Immobilisierungsmethoden.<br />
Durch die chronocoulometrischen Bestimmungen <strong>der</strong> Oberflächenbelegung konnte<br />
gezeigt werden, dass die Standard-Immobilisierung und die Methode mit <strong>der</strong> zweifachen<br />
Nachbelegung die höchste Sonden-Belegung aufweisen. Durch den Einsatz<br />
<strong>der</strong> Koimmobilisierung konnte <strong>der</strong> Wert gesenkt werden. Abhängig von <strong>der</strong> Konzentration<br />
des Nachbelegungsmittels schwankt dieser Wert zwischen 7,5 und<br />
3,5 pmol/cm² und liegt somit nahe dem von Steel et al. 45 ermittelten Optimum von<br />
4 pmol/cm² für die Oberflächenkonzentration eines Monothiol-modifizierten Nukleotides<br />
von 20 Basen.<br />
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