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Bei der Bestimmung der Signalstabilität zeigte sich, dass bei der 2fachen Nachbelegung
die niedrigsten Hybridisierungssignale gemessen wurden. Im Gegensatz
dazu unterschieden sich die anderen Methoden in der Signalhöhe, mit Ausnahme der
Koimmobilisierung mit 900 µM Mercaptohexanol, kaum. Ein weiterer Vergleich der
einzelnen Stabilitätskurven für die verschiedenen Immobilisierungsmethoden zeigte,
dass bei der Koimmobilisierung mit 225 µM Mercaptohexanol bei den ersten 7
Messungen der geringste Signalverlust auftrat. Das Verhältnis Sonde:Nachbelegungssubstanz
besitzt bei dieser Koimmobilisierung einen Wert von etwa 1:8. Bei
Zugabe von 900 µM Mercaptohexanol verlor die Elektrode allerdings bereits nach
der 7. Hybridisierung ihr Signal vollständig. Im Gegensatz zu den anderen Immobilisierungsmethoden
wurden bei der 2fachen Nachbelegung mit Mercaptoundecan und
Mercaptohexanol sehr kleine Signal gemessen.
Die Ursache dafür besteht darin, dass sich um die Sonde durch den relativ kleinen
Linker und eine nicht vorhandene Spacersequenz keine ausreichend große Kavität
bilden konnte, die die Hybridisierung von Sonde und Target erleichtert hätte.
A
C
B
Abb. 5.7: Schematische Darstellung der
SAM’s. (A) Klassische Immobilisierung,
(B) Koimmobilisierung
von Sonde und Mercaptohexanol,
(C) zweifache Nachbelegung mit
Mercaptoundecan und Mercaptohexanol
Bei einem Einsatz einer Sonde mit Spacer würde diese bei der Behandlung in
Ethanol einen größeren Raum für das langkettige Mercaptan blockieren. Das hätte
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