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der Schwefelatome im Linker erfolgt eine stärkere Readsorption des gebildeten
Thiols, da eine simultane Spaltung aller Schwefel-Gold-Bindungen unwahrscheinlich
ist.
Das erklärt auch den 5-20%ige Verlust der Oberflächenbelegung der Monothiol-
Sonden nach der ersten Dehybridisierung.
5.3 Untersuchte Targetmodifizierungen
Während dieser Arbeit wurden insgesamt 5 Targetmodifizierungen untersucht und
miteinander verglichen. Ziel dieser Versuche war es mögliche Alternativen zu dem
Ferrocen-Marker zu finden um eine Abhängigkeit von den wenigen Anbietern für
solche Marker zu verhindern. Dabei handelte es sich um 2 reversible Markierungen,
das Ferrocen und den Thymin-Os-bipyridin-Komplex, der bereits von Palecek beschrieben
wurde, und die sehr weit verbreiteten optischen Marker wie Dabcyl,
Fluorescein und Texas Red. Von diesen Farbstoffen ist allerdings nur das Dabcyl zur
Detektion an Goldelektroden geeignet. Die Potentiale der anderen beiden Marker
lagen bereits außerhalb des Potentialfensters für Gold.
Abb. 5.8: Eingesetzte kovalent gebundene Marker und ihre Redoxpotentiale
In Abb. 5.8 sind die Redoxpotentiale für die einzelnen Marker dargestellt. Der
Ferrocen-Marker reagiert als einziger im positiven Potentialbereich bei etwa 0,25 V
vs. Ag/AgCl. Die anderen beiden Marker reagieren im Gegensatz dazu im negativen
Bereich. Die im Bereich von etwa -0,5 V reagierende Dabcyl-Markierung zeigt ein
sehr kleines irreversibles Hybridisierungssignal bei einer Targetkonzentration von
800 µM. Die Signalhöhe betrug weniger als 25 nA. Die größten Hybridisierungssignale
wurden mit der Osmium-Markierung gemessen. Die Signalhöhe lag dabei bei
einer Konzentration von weniger als 200 nM im Bereich bis 1,5 µA. Das Ferrocen
lieferte in diesem Konzentrationsbereich deutlich kleiner Detektionssignale, die
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