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Diese hatte auch den Vorteil, dass die Darstellung dieser Markierung sehr einfach ist.
Dadurch wurde außerdem die Abhängigkeit unserer Arbeitsgruppe von der ohnehin
geringen Anzahl der Anbieter redoxaktiv markierter Targets verringert.
Bei der hier verwendeten Osmium-Markierung konnte wegen der mehrfachen
Ausbildung des redoxaktiven Komplexes an den Thymidin-Resten der DNA ein
besonders großes Signal beobachtet werden. Fojta et al. beobachteten bei einer
adsorptiven Stripping Voltammetrie mit Os-markierten Targets an Elektroden aus
pyrolitischen Graphit vergleichbare Signale 57 . Allerdings erfolgte die Detektion nach
einer Aufreinigung des Targets mit magnetischen Nanobeads und anschließender
Dehybridisierung an unmodifizierten Elektroden. Nachteilig bei der Darstellung
dieser Markierung ist die hohe Toxizität des Osmium(VIII)-Oxids, wobei die in
unserem Labormaßstab eingesetzten geringen Mengen die Grenzwerte nicht
überschreiten werden. Der Grenzwert, der sogenannter MAK-Wertes, von 2 mg/m³
am Tag wurde nicht erreicht. Das lag daran, dass die Arbeiten einerseits unter einem
Abzug erfolgten und die stark verdünnten Lösungen andererseits in sehr geringen
Mengen eingesetzt wurden.
Während des Einsatzes dieser Markierung wurde festgestellt, dass eine Qualitätskontrolle
und verbesserte Reinigung des modifizierten Targets noch ausgearbeitet und
eingeführt werden muss. Dadurch wäre auch der Erhalt vergleichbarer Targetchargen
gewährleistet.
Der Einfluss von Sekundärstrukturen, dass heißt der Ausbildung von intramolekularen
Doppelsträngen, ist bei den hier verwendeten kurzen Oligomeren mit 25 Basen
vernachlässigbar. Das zu modifizierende Thymidin-Pentamer besitzt eine endständige
Lage, die weder durch das Target oder den Schutzstrang blockiert werden
kann
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