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allerdings noch im Bereich bis 300 nA lagen. Diese Werte beziehen sich alle auf die
Messung mit der Scheibenelektrode bei 1000 U/min und Raumtemperatur.
5.3.1 Vorversuche zum elektrochemischem Verhalten von Dabcyl
Im Verlauf dieser Arbeit wurde festgestellt, dass eine Alternative zum ferrocenmarkierten
Target notwendig wurde. Bei einer Literaturrecherche über die chemische
Detektion verschiedener Farbstoffe konnte festgestellt werden, dass der Einsatz einiger
kommerziell erhältlicher optischer Markierungen für die elektrochemische Detektion
von Nukleinsäuren durchaus möglich ist 160,161,162,163,164 . Die Vermutung
wurde durch die Bachelorarbeit von Hr. Voss über das elektrochemische Verhalten
verschiedener Farbstoffe bestätigt.
Bei den anschließend durchgeführten Vorversuchen bestätigte sich diese Vermutung,
wobei allerdings nur das Dabcyl in dem für Gold typischen Potentialfenster lag. Die
voltammetrischen Vorversuche erfolgten in 10 mM TRIS-Puffer mit 0,5 M Na 2 SO 4
bei pH 7,5 und Raumtemperatur bei einer Konzentation von 1 mM Dabcyl für die
Versuche mit der Goldelektrode. Die Versuchsreihe wurde durch polarographische
Messungen, die mir freundlicher Weise von Dr. Flechsig zur Verfügung gestellt
wurden, ergänzt. Diese erfolgten mit einer Konzentration von 100 µM bei der Tast
Polarographie (DCT) und Differential Puls Polarographie (DPP) bzw. 25 nM bei der
adsorptiven Stripping Voltammetrie (AdSV). Der Elektrolyt wurde bei allen Vorversuchen
20 min mit Argon gespült. Im Gegensatz zu den voltammetrischen Versuchen
erfolgten diese Messungen an Quecksilberelektroden. Als Referenz dienten Kalomelelektroden
und ein Platinstift als Gegenelektrode. Um die Messungen mit den
eigenen vergleichen zu können, wurde die Potentialdifferenz zwischen den bei
Referenzelektroden ermittelt. Mit Hilfe dieser Differenz konnten die Potentiale,
bezogen auf die Ag/AgCl-Referenz berechnet werden.
In Abb. 5.9 sind die polarographischen Messungen und der Reaktionsmechanismus
dargestellt. Dabei ist zu erkennen, dass nur an der DME der zweite Reaktionspeak
deutlich zu erkennen ist. Bei der adsorptiven Stripping Voltammetrie an der HMDE
ist nur ein Peak deutlich ausgebildet. Die Ursache dafür besteht darin, dass der
Ausgangsstoff für die Reaktion bei der DME durch die Regeneration der Elektrode
ständig nachgeliefert werden kann. An der HMDE ist das nicht der Fall. Bei der
adsorptiven Stripping Voltammetrie kann nur der adsorbierte Analyt umgesetzt
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