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Abb. 5.3: Vergleich von je 0,8 µM komplementären Target-Sonde-Duplex (blau)
und Einzelbasen-Missmatch-Sonden-Duplex (rot) in 0,1 M PB pH 7,0. 53
Abb. 5.4: Vergleich der Stabilität des Hybridisierungsssignals der Tetrathiol-
(durchgängige Linie) und Monothiol-Sonde (unterbrochene Linie).
Hybridisierung 4 min in 80 nM Ferrocen-Target bei Raumtemperatur
an einer Scheibenelektrode bei 1000 U/min............................................ 55
Abb. 5.5: Vergleich der Oberflächenbelegung der einzelnen Immobilisierungsmethoden.
................................................................................................ 56
Abb. 5.7: Schematische Darstellung der SAM’s. (A) Klassische Immobilisierung,
(B) Koimmobilisierung von Sonde und Mercaptohexanol, (C) zweifache
Nachbelegung mit Mercaptoundecan und Mercaptohexanol.................. 58
Abb. 5.8: Eingesetzte kovalent gebundene Marker und ihre Redoxpotentiale........ 60
Abb. 5.9: Charakterisierung von Dabcyl an Quecksilberelektroden bei
Raumtemperatur in 10 mM TRIS-Puffer mit 0,5 M Na 2 SO 4 bei pH 7,5.
(A) Tast Polarographie und (B) Differenz Puls Polarographie an der tropfenden
Quecksilberelektrode. (C) adsorptive Stripping Voltammetrie an
einer hängenden Quecksilberelektrode. Aufgenommen wurden jeweils
der reine Puffer (a) und Puffer mit Dabcyl (b), für A und B je 100 µM
bei einer Tropfzeit von 0,5 sec, Scanrate 10mV/sec., für C 25 nM nach
5 min Anreicherungszeit Scanrate 10 mV/sec. ....................................... 62
Abb. 5.10: Kurvenverlauf für 100 µM Dabcyl (durchgängige Linie) bei
voltammetrischen Messungen an der Goldscheibenelektrode. ............... 63
Abb. 5.11: Vergleich des Hybridisierungspeaks von 0,8 µM dabcylmarkierten Target
an einer sondenmodifizierten Goldscheibenelektrode (a) und des AdSV-
Peaks von reinen Dabcyl an einer HMDE (b) in TRIS-Puffer bei
Raumtemperatur ...................................................................................... 64
Abb. 5.12: Strukturen der beiden Farbstoffe.............................................................. 65
Abb. 5.13: ACV-Diagramme für 1 mM Sulforhodamin (oben links) und 1mM
Fluorescein (oben rechts). Darunter die Diagramme für die markierten
Targets. Sulforhodamin-Markierung links und Fluorescein-Markierung
rechts. Messpuffer 10 mM TRIS mit 0,5 M Na 2 SO 4 pH 7,5.
Hybridisierung je 30min in 160 nM Target bei Raumtemperatur und
1000 U/min.............................................................................................. 66
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