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466 TERAPIA PROTEiCA
FQ: la “prueba del sudor” (51,52). Dicha prueba contrasta con las técnicas más recientes y sofisticadas de DPN
o MCI que aún se encuentran limitadas a Centros que tienen la experiencia requerida. Ambas pruebas proporcionan
medidas fisiológicas directas de la actividad del canal iónico a nivel del epitelio nativo, y se realizan in vivo
y ex vivo, respectivamente.
Las determinaciones de DPN ofrecen información del transporte de Na + y de Cl - (53,54) y distinguen el epitelio
normal de las vías aéreas del afecto de FQ ya que: la DP resultante de la superficie de la vía aérea es más negativa
en la FQ; tras la perfusión del bloqueador del canal ENaC amilorida, la diferencia es también mayor en la FQ; y
la creación de un gradiente de Cl - (mediante la perfusión de una solución sin Cl - ) tras la activación de CFTR con
isoprotenerol produce una DP más negativa en los sujetos sin FQ y tiene un efecto menor o nulo en los pacientes
con FQ.
Varios estudios previos con el uso de las determinaciones de la DPN para examinar la relación entre las respuestas
secretoras de Cl - en epitelio nativo y las características clínicas de la FQ, ofrecieron resultados contradictorios (55-
57). Esto podría deberse en parte a la dificultad en detectar la secreción de Cl - mediada por CFTR en el epitelio
nasal que expresa CFTR a niveles bajos en comparación, por ejemplo, con el colon (58). Además, la técnica DPN es
bastante incómoda para el paciente e irrealizable en los más jóvenes (< 6 años).
Para realizar la MCI se precisan una biopsia intestinal y un dispositivo especial. En la FQ existe una alteración de
la secreción intestinal de Cl - , mientras que no hay cambios en los procesos absortivos e incluso pueden estar aumentados.
La respuesta al carbacol consta de dos componentes: una corriente positiva de luz que probablemente
está causada por el eflujo apical de potasio, y una corriente negativa de luz, producida por la secreción apical de
Cl - . En las medidas del MCI de individuos sanos el componente de eflujo de potasio en reacción al carbacol está
enmascarado por el eflujo mucho mayor de Cl - . En la FQ la respuesta es inversa, debido al eflujo apical de potasio
(K + ) en ausencia de eflujo de Cl - .
Debería añadirse que para que algunos de estos marcadores puedan elegirse como criterios de valoración alternativos,
la cantidad de CFTR necesaria no sería independiente de si el que intentamos corregir fuera un tipo silvestre
(wt) o una proteína mutada, puesto que la mayoría de los transportadores mutados, como F508del, también presentan
defectos de regulación/apertura-cierre (9).
Además, de entre estos 3 biomarcadores, es esperable que únicamente el MCI tenga potencial para servir como
indicador del efecto beneficioso de los correctores de CFTR, ya que es el único que puede realizarse ex vivo. Esto
es especialmente cierto si el compuesto en investigación es un “corrector puro”, es decir, corrige la localización
intracelular de CFTR con la mutación F508del permitiéndole que alcance la membrana plasmática, pero carece
de actividad potenciadora (5). De hecho, varias mutaciones de clase II, especialmente CFTR-F508del también
presentan defectos importantes del mecanismo de apertura-cierre o gating (28,29), es decir, también son mutaciones
de clase III. En consecuencia, si el método de evaluación se basa únicamente en el efecto de liberación de la
actividad de CFTR, podría infravalorarlo o no detectarlo del todo. Sin embargo, si se prueba la actividad de CFTR
realizándose ex vivo (p.ej. mediante MCI), se pueden aplicar directamente sobre el tejido extirpado del paciente
bajo tratamiento corrector potenciadores potentes (p.ej. genisteína, VX-770) para evaluar la actividad completa
de CFTR, y así liberar la proteína mutada de la membrana. Sabiamente, este problema se puede evitar realizando
ensayos combinados de correctores con potenciadores (p.ej. de VX-809 y VX-770) en los que eso ya no sería un
problema, puesto que el potenciador repara el defecto de clase III (46).
Adicionalmente, de forma alternativa se pueden utilizar otros biomarcadores de la expresión del gen CFTR o en
combinación con los tres previos, como el porcentaje de ARNm de CFTR normal (wt) como se ha sugerido previamente
(9,59), la cantidad de proteína presente (p.ej. para terapia génica) (60), o mejor, una evaluación cuantitativa
de la proteína de localización apical en células epiteliales nativas (61,62).