Programme et Résumés - Inra

incluant certains cancers, les maladies cardio-vasculaires, l’ostéoporose ou les maladies
oculaires. L’oxydation des lipoprotéines et des acides nucléiques est même proposée comme
un événement primaire dans les maladies cardio-vasculaires et les cancers.
2. Stress oxydant : notions de biomarqueurs
L’implication du stress oxydant dans diverses pathologies est également suggérée sur la
base des études épidémiologiques établissant des corrélations inverses entre l’apport en
micronutriments antioxydants et certaines pathologies dégénératives. Cependant, la relation
de causalité reste à établir. Les moyens utilisés pour établir cette relation sont les études
d’intervention et l’utilisation de biomarqueurs. Les études d’intervention présentent
l’avantage d’être démonstratives mais lourdes à mettre en œuvre, onéreuses et nécessitant des
délais relativement longs. Le concept de biomarqueurs a été proposé comme une alternative à
l’essai d’intervention à long terme. Ce concept repose sur l’hypothèse que les dommages
oxydatifs affectant les lipides (LDL oxydées) et le matériel génétique (ADN oxydés) ont un
lien de causalité sur les pathologies telles que l’athérosclérose et le cancer. Par conséquent, les
agents susceptibles d’éviter ces dommages devraient diminuer les risques de développement
de ces pathologies et le niveau des produits oxydés plasmatiques ou urinaires constitue un
marqueur précoce d’un développement ultérieur de pathologies oxydatives. Les biomarqueurs
les plus utilisés sont les produits issus des dommages de l’ADN (8-hydroxydeoxyguanosine),
des protéines (dérivés carbonylés), des lipides (lipides oxydés, F2-isoprostanes) et la
détermination du pouvoir antioxydant global plasmatique.
L’ADN peut être obtenu à partir de cellules sanguines, buccales ou de la peau. L’étude de
l’oxydation de l’ADN peut donc être réalisée chez l’homme. Mais les techniques de
purification de l’ADN et les mesures des bases oxydées présentent encore quelques difficultés
techniques. Une approche plus commune est la technique dite « essai comète » réalisée sur
des lymphocytes et consiste à déterminer la surface occupée par l’ADN marquée par un agent
fluorescent après migration dans un gel soumis à un champ électrique ; la trace laissée sous
forme de comète est proportionnelle aux dommages initiaux de l’ADN nucléaire.
L’oxydation des protéines entraîne l’apparition de dérivés carbonylés et de pigments
fluorescents plasmatiques issus des interactions avec les produits oxydés des lipides.
La susceptibilité des lipoprotéines (LDL) à l’oxydation est un marqueur valable de la
peroxydation lipidique mais il reste à préciser des moyens appropriés pour la préparation des
LDL et l’induction de leur oxydation in vitro. D’autres marqueurs de lipides oxydés comme le
test à l’acide thiobarbiturique et des peroxydes plasmatiques montrent une variabilité
inexpliquée. Enfin, un essai prometteur est la détermination du F2-isoprostane, des produits
spécifiques de la peroxydation de l’acide arachidonique. Sa mise en œuvre est en cours de
simplification pour des analyses en routine.
Une autre approche consistant à mesurer la capacité antioxydante globale du plasma est en
plein essor. Cette approche permet de prendre en compte la contribution de tous les
antioxydants plasmatiques identifiés ou non. Les techniques dites de TEAC, de FRAP et
d’ORAC sont les plus utilisées. Ces techniques sont simples et utilisables en routine.
Pour des raisons de difficulté de la mise en œuvre, de reproductibilité ou de validité éprouvée,
rares sont les études épidémiologiques et d’intervention où ces biomarqueurs ont été pris en
compte. La validation de ces biomarqueurs est un des objectifs à atteindre pour estimer si les
dommages oxydatifs du DNA, des protéines et des lipides sont des marqueurs précoces d’un
développement ultérieur de cancer et de maladies cardiovasculaires.
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Université d'été de Nutrition 2003 – Clermont-Ferrand – 17-19 septembre 2003