2. Material und Methoden - ArchiMeD

DISKUSSION
sowie Rezeptoren mit zwei oder drei Immunglobulin-ähnlichen Domänen. Im Fall von
FGFR3 sind bis jetzt lediglich zwei unterschiedliche Varianten bekannt, die sich in der C-
terminalen Hälfte der Immunglobulin-ähnlichen Domäne 3 unterscheiden (Murgue et al.,
1994). Wie bei FGFR1 und FGFR2, bei denen diese Varianten ebenfalls bekannt sind, ändert
sich hierdurch die Ligandenspezifität. Während die wesentlich häufiger vorkommende IIIc-
Variante verschiedene Liganden binden kann (FGF1, FGF2, FGF4), ist die IIIb-Form durch
eine sehr restringierte Bindung (FGF1) ausgezeichnet. Die FGFR3 IIIb-Variante hat
wahrscheinlich die am stärksten eingeschränkte Liganden-Bindungseigenschaft von allen vier
bekannten FGFRs (Chellaiah et al., 1994). Um die entwicklungsbiologische Relevanz der
zwei verschiedenen FGFR3-Varianten zu untersuchen und mögliche Hinweise auf ein
krankheitsrelevantes Expressionsmuster zu erhalten, wurde das Expressionmuster der beiden
FGFR3-Varianten während der Mausentwicklung untersucht.
Mit Hilfe von Exon IIIb- bzw. IIIc-spezifischen Oligonukleotiden wurden in situ-
Hybridisierungsexperimente der zwei verschiedenen Formen während unterschiedlicher
Phasen der murinen Entwicklung (E12, E14 und E20) durchgeführt. Eine Kreuzhybridisierung
der zwei Fgfr3-spezifischen Sonden mit dem Fgfr2-Gen konnte aufgrund geringer Homologie
(51% bzw. 57%) ausgeschlossen werden.
Die Experimente zeigten, dass sich die beiden Formen in ihrem Expressionsmuster deutlich
unterscheiden. Die wesentlich häufigere IIIc-Form wird stärker und früher im sich
entwickelnden Skelett und im zentralen Nervensystem exprimiert, wohingegen die IIIb-
Variante ausschließlich in epithelialen Strukturen nachweisbar war. Die Expression war hier
vor allem in epithelialen Strukturen des Gastrointestinaltrakts, der Bronchien, dem
Blasenepithel und in den epithelialen Zellschichten der Epidermis nachweisbar.
Die gewonnenen Erkenntnisse stehen im Einklang mit bereits bekannten Ergebnissen
bezüglich der Expression von FGFR1 und FGFR2 bzw. ihrer entsprechenden IIIb- und IIIc-
Varianten. So wird die FGFR2-IIIb-Variante auch in erster Linie in epithelialen Strukturen
exprimiert.
Wie bereits unter 4.1.3 beschrieben, konnte auch bei Patienten mit Crouzon-Syndrom und
Acanthosis nigricans eine Mutation im FGFR3-Gen nachgewiesen werden. Gerade die
genauere Untersuchung der in der Haut exprimierten FGFR3-IIIb Variante könnte die
Krankheitsentstehung und die funktionelle Bedeutung dieser Spleißform weiter aufklären
helfen.
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