2. Material und Methoden - ArchiMeD

DISKUSSION
Bertolotti et al., 1996), die mehrere RRM-Domänen besitzen, sowohl einzel- als auch
doppelsträngige DNA binden kann. Somit stellt MINT ein neues Mitglied einer
expandierenden Familie von Transkriptionsfaktoren dar, deren Einfluss über die RRM-
Domäne durch Interaktion mit einzel- und doppelsträngiger DNA vermittelt wird.
Die funktionelle Verbindung zwischen dem N-terminalen RRM-Fragment, dem C-terminalen
Fragment mit Msx2-Bindungseigenschaften und den in der Arbeit nachgewiesenen alternativ
gespleißten Varianten muss noch ermittelt werden.
Msx2 ist ein Transkriptionsfaktor der bei der Osteoblastendifferenzierung eine Funktion
übernimmt. Das Homööbox-Protein ist ein negativer Regulator der Osteocalcin Transkription
in Osteoblasten und Odontoblasten (Newberry et al. 1997; Liu et al., 1999). Jedoch zeigten
zahlreiche Untersuchungen, dass Msx2 nicht allein für die transkriptionelle Repression
verantwortlich ist (Zhang et al., 1996).
Ein weiterer wesentlicher Faktor der Osteoblastendifferenzierung ist Cbfa1. Das Cbfa1-
„Knock-out“-Mausmodell konnte wesentlich zum Verständnis der Differenzierungsprozesse
von Osteoblasten beitragen. Homozygot mutante Cbfa1-Mäuse besitzen ein korrekt
ausgebildetes Skelett, was jedoch ausschließlich aus Knorpelgewebe und nicht aus
Knochengewebe besteht und auf einen Mangel an Osteoblasten zurückzuführen ist (Otto et al.,
1997; Komori et al., 1997).
Durch einen Homologievergleich der murinen MINT-cDNA Sequenz und der eigenen
ermittelten Spleißvarianten mit der htgs-Datenbank konnte das humane Gen identifiziert
werden (Accession Nummer: AL034555). Der Vergleich der Sequenzen zeigt, dass sich die
humane MINT-cDNA aus mindestens 24 Exons zusammensetzt und einen Bereich von mehr
als 30 kBp umspannt. Der genomische Klon stammt aus der Region 1p36.11-36.33, was die in
der vorliegenden Arbeit durchgeführte chromosomale Lokalisation durch FISH-Analyse
bestätigt. Mit dieser Lokalisation befindet sich das humane MINT-Gen in einer
chromosomalen Region, die als eine von mehreren Kandidatenregionen für Osteopenie
angesehen wird (Deveto et al., 1998). Osteopenie ist die Bezeichnung für
Knochenveränderungen, die durch Calciummangel infolge von Malabsorption und
verminderter Zufuhr hervorgerufen werden. Im hohen Alter ist die Osteopenie von der
Osteoporose als Krankheit praktisch nicht zu trennen ist (Pschyrembel, 1994). Innerhalb der
Region 1p36.11-36.33 konnten 14 Gene und 22 cDNA-Sequenzen identifiziert werden. Als
mögliche Kandidatengene werden zur Zeit das Gen für Lysyl-Hyroxylase (PLOD) und das
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