Allgemeine Mikrobiologie

6.5ZusammensetzungvonNährmedienundKultivierungstechniken 165
Abb. 6.3 Verteilung des Sauerstoffs in und
unter einer Kolonie von Bacillus cereus, die auf
Komplexagarwächst.DieSauerstoffpartialdrücke
wurdennach dreitägiger Inkubation bei 30 hCmit
einer O 2 -Mikroelektrode gemessen. Die Werte
sind in Prozenten der in luftgesättigtem Agar
gemessenenPartialdrückeangegeben.
seineLöslichkeitsehrgeringist:UnterLuftsättigungbei20 hCbeträgtdie
Sauerstoffkonzentration nur 280 mmol pro Liter. Diese Konzentration
reichtgeradeaus,um46 mmoloder8,3mgGlucoseproLiter(etwaden
tausendsten Teil der in vielen Nährlösungen enthaltenen Glucose) zu
oxidieren.
Anaerobenkultur
FürdasWachstumvonstrenganaerobenProkaryontenistVoraussetzung,
dassLuftsauerstoffabsolut ausgeschlossenwird.DieAnaerobentechnik
arbeitet mit entlüfteten, ausgekochten Nährlösungen, luftblasenfrei
verschlossenenFlaschen,sauerstofffreienGasatmosphäreninAnaerobentöpfen,
Sauerstoffabsorptionsmitteln (alkalisches Pyrogallol, Dithionit,
Kupfer-I-chlorid)undanderenHilfsmitteln.DietoxischenEffektevonverbliebenenSpurenvonLuftsauerstofflassensichdurchReduktionsmittel
(Ascorbinsäure,Thioglykolat,Cystein,SulfidoderTitan(III)-NTA)inden
Nährlösungen erfolgreich ausschalten. Auch Wasserstoff in Gegenwart
eines Palladiumkatalysators hat sich zur schonenden Reduktion von
Nährlösungenbewährt.
ÄußerstsauerstoffempfindlicheMikroorganismenkannmanebenfalls
an der Luft überimpfen, wenn durch einen kontinuierlichen Strom
vonsauerstofffreiemStickstoff indieKulturgefäßedafür gesorgtwird,
dassderNährbodennichtmitderLuftinBerührungkommt(Hungate-
Technik). Alternativ kann man in einer Anaerobenbank (Glove-Box)
arbeiten,diemiteinemsauerstofffreienStickstoff/Wasserstoff-Gemisch
oderArgongefülltist.
Als Farbindikator für anoxische Bedingungen setzt man dem NährbodenselbstoxidierendeFarbstoffewieResazurinzu(inGegenwartvon
Sauerstoff:blau,reduziert:farblos,nachReoxidation:rot)odergibtden
Anaeroben-InkubationstöpfeneinGefäßmit eineralkalischen Glucose-
Methylenblau-Lösungbei(reduziert:farblos).
MikroaerobeBakterienentwickelnsichbevorzugtineinemgewissen
AbstandvomluftgesättigtenMedium(Abb.6.4).
Abb. 6.4 Wachstum aerober, mikroaerober
und anaerober Bakterien in einem homogen
beimpftenAgarmedium.
Aus Fuchs, G. : Allgemeine Mikrobiologie (ISBN 978-313-444608-1) © Georg Thieme Verlag KG 2007
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