Mechanismen und On-line Dosimetrie bei selektiver RPE Therapie

Kapitel 6: Ergebnisse und Diskussion______________________________________________ 127
Fluoreszenzintensität [a.u.]
1000
900
800
700
600
Datenfit mit e -n/τ
40.0 µJ
35.0 µJ
30.0 µJ
27.5 µJ
25.0 µJ
22.5 µJ
20.0 µJ
500
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Laserpulsnummer
Abbildung 6.42 :Normierte Autofluoreszenzintensität einer Schweine-RPE Probe über der
Anzahl der applizierten Laserpulse für verschiedene Pulsenergien bei
500 Hz Pulswiederholrate. Die Fluoreszenzintensität fällt über der Anzahl
der applizierten Pulse ab. Die Abnahme beträgt bis zu 22%. An alle Kurven
wurde ein monoexponentieller Fluoreszenzintensitätsabfall mit der
Abfallkonstanten τ angepaßt.
An die Meßdaten wurde ein monoexponentieller Abfall mit der Abfallkonstanten τ als
Maß für die Abfallgeschwindigkeit angefittet. Über sieben Proben gemittelt sind die Fluoreszenzabfallkonstanten
über der applizierten Pulsenergie in Abb. 6.43 A aufgetragen. Es
ergibt sich eine starke Änderung der Abfallkonstanten bei einer Bestrahlung von
130 mJ/cm² (Abb. 6.43 A).
Bei der Anfärbung mit CalceinAM zeigte sich neben den in Kap. 5.3.2 beschriebenen
Zellfärbungen (RPE nicht angefärbt - RPE-Zelle tot; RPE fluoresziert - RPE-Zelle vital)
auch eine Hyperfluoreszenz im bestrahlten Bereich. Die hyperfluoreszenten Zellen wurden
neben den beiden bekannten Kriterien (vital / tot) gesondert ausgewertet. Durch Auszählen
der jeweiligen RPE-Zellen pro bestrahltem Areal erhält man die
Schadenswahrscheinlichkeit in Abhängigkeit der applizierten Pulsenergie (Abb. 6.43 B).
Die RPE-Schadenswerte und die Werte für hyperfluoreszente RPE-Zellen wurden statistisch
mit Probit (Kap. 5.8.4) ausgewertet und die ED 50-Schwellenwerte bestimmt.
Beim Vergleich der Kurven aus Abb. 6.43 A und Abb. 6.43 B sieht man in diesem Fall
eine Änderung der Autofluoreszenzabfallkonstanten τ bei Zunahme der hyperfluoreszenten
RPE-Zellen.