Mechanismen und On-line Dosimetrie bei selektiver RPE Therapie

52 ____________________________________________ Kapitel 5: Material und Methoden
Für die Versuche wurde der in Kap. 5.1.4 beschrieben Argon Laseraufbau verwendet. Es
wurden einzelne Laserpulse mit Pulslängen 5 µs, 50 µs, 500 µs und 3 ms bei verschiedenen
Pulsenergien appliziert. Während der Bestrahlung wurden die optoakustischen
Signale mit dem in Kap. 5.5.1 beschriebenen Aufbau gemessen und simultan Reflexmessungen
mit dem in Kap. 5.6.2 erläuterten Spaltlampenaufbau gemacht.
Durch die Wahl eines kleinen Spotdurchmessers von 50 µm (ca. 8 RPE-Zellen) und der
damit verbundenen niedrigen Pulsenergien, aber vor allem der Verwendung langer Laserpulse
können die bei Bestrahlung entstehenden sehr schwachen thermoelastischen Transienten
nicht detektiert werden. Im Vergleich zu einer verwendeten Pulslänge von 1.7 µs
mit gleicher Bestrahlung und 178 µm Bestrahlungsdurchmesser reduziert sich die thermoelastische
Druckamplitude um 96 % [78] bei der Applizierung von 5 µs Laserpulsen
in einen 50 µm Spot.
keine
Mikroblase
diffuse
Rückstreuung
Nachweis: keine
Mikroblasenbildung
Laserpuls
Mikroblasentransiente
Mikroblase
Abbildung 5.25 :Prinzipskizze der Einzelpulsuntersuchungen zum Nachweis des RPE-Schadensmechanismus
im µs- bis ms-Zeitbereich.
5.8 Parameterstudien in vivo am Kaninchen
transiente Rückstreuung
durch Mikroblasen
Nachweis:
Mikroblasenbildung
Die ersten Versuche zur selektiven Schädigung des RPEs wurden von Roider und Birngruber
an Kaninchen durchgeführt [2]. Dabei wurde mit einem Argonlaser (5 µs, 500 Hz,
100 Pulse) und einem Nd:YAG (200 ns, 500 Hz, 100 Pulse) bestrahlt [2]. Es wurde von
einem thermisch induzierten RPE-Schaden ausgegangen. Im schwellennahen Bereich
zeigten sich in den histologischen Ergebnissen keine entscheidenden Unterschiede zwischen
beiden Lasersystemen. Erst bei vierfach überschwelliger Bestrahlung mit dem
Nd:YAG wurden Schäden an den Außensegmenten der Photorezeptoren sichtbar. Der
direkte Vergleich mehrfach überschwelliger Bestrahlung, z.B. bei Einzelpulsen mit 5µs
Pulsdauer, war aus technischen Gründen nicht möglich.
Da sich im Rahmen dieser Arbeit zeigte, dass es bei Einzelpulsen mit 5µs Bestrahlungsdauer
(Kap 6.5) zu Mikroblasenbildung bei der Schädigung der RPE-Zellen kommt,
wurde in Tierexperimenten untersucht, ab welcher kürzeren Pulsdauer es zu einer signifikant
anderen Schädigungszone um das RPE herum kommt. Auch galt es die Additivität
multipler Laserpulse bei bekanntem Schadensmechanismus zu untersuchen.