Mechanismen und On-line Dosimetrie bei selektiver RPE Therapie

Kapitel 5: Material und Methoden _____________________________________________ 41
oder andererseits die Summation nach dem Hygenschen Prinzip. Dabei wird die Schallabstrahlungsfläche,
in unserem Fall die bestrahlte Fläche im Auge, in mehrere Punktwandler
unterteilt die Kugelwellen aussenden. Es muß darauf geachtet werden, dass der
Abstand der einzelnen Punktwandler auf der Wandlerfläche klein gegenüber der abzustrahlenden
Wellenlänge ist.
Am Aufpunkt der Schallfeldbestimmung werden dann die Amplitude und Phase der Einzelwandler
numerisch addiert. Mit dem Computer ist sowohl die numerische Integration
der Gleichung (9)[68], als auch die Parametrisierung der Wandlerfläche in viele Punktwandler
mit anschließender Summation möglich [69].
Die Simulationen wurden mit dem Softwarepaket ULTRASIM durchgeführt. Es ist ein
GUI-Projekt der Universität Oslo zur Simulation von Schallfeldern medizinischer Ultraschallwandler
[70]. Es basiert auf dem Programm MATLAB [72] und wurde in Unterroutinen
mit Bedienoberfläche umgesetzt. Es simuliert nach dem Hygenschen Prinzip die
Schallabstrahlung beliebiger Schall abstrahlender Flächen.
5.3 Organmodell Schweine-RPE
Die in vitro Experimente wurden an Schweine RPE-Präparaten durchgeführt: Die
Schweineaugen wurden vom Schlachthof der Norddeutschen Fleischzentrale Lübeck
(NFZ) zur Verfügung gestellt. Die vorwiegende Rasse war “Deutsche Pig” die beim
Schlachten in etwa 24 Monate alt war. Die Tiere werden mit CO 2 narkotisiert und per Bolzenschuß
getötet. Die Augen werden direkt nach dem Schlachten vom Personal des
Schlachthofes entnommen und in feuchter Umgebung zum Transport gelagert. Innerhalb
von 4 Stunden wurden die Experimente mit Präparation, Bestrahlung und Färbung abgeschlossen.
Da die RPE-Pigmentierung der Mastschweine teilweise sehr gering war, bis
hin zu Albinismus, wurden für die Experimente ausschließlich stark pigmentierte Schweineaugen
verwendet. Diese zeigten bei Beleuchtung des Auges von hinten kein, oder nur
wenig Lichttransmission durch die Pupille.
5.3.1 Probenpräparation
Für die Präparation werden die Augen äquatorial eröffnet und der Glaskörper entfernt.
Aus dem hinteren Augensegment wird ein etwa 1 cm² großes Präparat ausgeschnitten.
Die Netzhaut kann leicht abgezogen werden, so dass das Präparat nur noch aus RPE,
Bruchscher Membran und Chorioidea auf der Sklera besteht. Die Präparate werden in
einen Probenhalter gelegt, mit PBS (Phosphate Buffered Solution) benetzt und mit einem
verschraubbaren Deckel gesichert (Abb. 5.15). Um eine Lichttransmission in optischer
Qualität zu erreichen und um das Präparat vor dem austrocknen zu sichern wird das Probenvolumen
mit einem Deckglas, welches durch Adhäsion selbst haftet, verschlossen.