Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

86 ERGEBNISSE
7 .4 Auswirkung eines Pyruvat-Pulses auf die globale Genexpression in MG1655
Um den Einfluss von Pyruvat auf die globale Genexpression von E. coli MG1655 zu
untersuchen, wurden der Stamm zunächst in M9-Minimalmedium mit 50 mM Glycerin bis zu
einer OD600 -0,4 kultiviert . Anschließend wurde der Kultur 50 MM Na-Pyruvat zugesetzt und
nach zweiminütiger Inkubation die RNA isoliert. Der Kontrollkultur wurde anstelle von Na-
Pyruvat das gleiche Volumen Wasser zugesetzt . Vor Zugabe von Pyruvat bzw . Wasser hatten
die beiden Kulturen eine Wachstumsrate von 0,36 h -1 .
Tab . 18 : Gene für die mindestens ein 2-fach erhöhtes bzw . erniedrigtes mRNA-Verhältnis nach
Zugabe von 50 mM Na-Pyruvat gemessen wurde . Der Referenz wurden anstelle von Pyruvat Wasser
zugesetzt . Die RNA wurde aus exponentiell wachsenden Zellen isoliert, die in Minimalmedium mit
50 mM Glycerin kultiviert wurden . Die Werte stellen Mittelwerte aus drei Experimenten dar, darunter 1
"colour-swap"-Experiment . UE = Untereinheit, DH = Dehydrogenase, Pyr = Pyruvat
B Gen Funktion relativer mRNA-
Level (+Pyr/-Pyr)
Transport- und Bindeproteine
n p-Wert
b4111 proP Prolinpermease 11 2,46 ± 0,02 2 0,024
b0760 modF Molybdat-Transportsystem 0,48 _ 0,05 2 0,024
b1101 ptsG glucosespezifisches IIBC-Komponente 0,45 ± 0,05 3 0,002
des PTS-Systems
b2416 ptsI PEP-Proteinphosphotransferase-System 0,44 ± 0,07 3 0,005
Enzym I
b1440 ydcS putatives ABC-Transportprotein 0,37 ± 0,04 3 0,001
b1817 manX mannosespezifisches Enzym IIAB des 0,50 ± 0,12 3 0,017
PTS-Systems ; liegt im manXYZ-Operon
b2091 gatD Galactitol-1-P-DH (Galactitol-1-P + 0.88 ± 0 .15 3 0.225
NAD+ --> L-Tagatose-6-P + NADH) ;
liegt im gatYZABCD-Operon
b2149 mgIA Methyl-Galactosid-Transport und 0,43 ± 0,08 3 0,007
Galactose-Taxis
b2150 mg1B Galactose-Transportprotein 0,20 ± 0,04 3 0,001
b3528 dctA C4-Dicarbonsäuretransporter (Fumarat, 0,45 ± 0,09 3 0,010
Malat und mit geringerer Affinität
Succinat)
b3748 rbsD D-Ribose-Transportsystem ; liegt im 0,42 ± 0,08 3 0,006
rbsDACBK-Operon
b3750 rbsC D-Ribose-Transportsystem 0,49 ± 0,08 2 0,049