Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

96 ERGEBNISSE
zeigte eine steigende Intensität im Verlauf der Fermentation, während die unphosphorylierte
TufA-Form (Spot 20) abnahm .
Zwei Stressproteine zeigten eine zunehmende Intensität im Verlauf der Fermentation,
nämlich das Chaperon DnaK und das universelle Stressprotein UspA . Demgegenüber nahm
die Intensität der Glutamat-Decarboxylase GadA, einem Protein gegen Säurestress, im
Verlaufe der Fermentation um etwa die Hälfte ab .
Tab . 20 : Proteine, deren Konzentration sich während einer acetatlimitierten Fed-Batch-Fermentation
von E. coli YYC2021dhA änderte . Unterschiede in den Proteinintensitäten wurden mit Hilfe der
ProteomWeaver-Software (Definiens Imaging GmbH, München) festgestellt . Die Identifizierung der
Proteine erfolgte durch Peptidmassenfingerprint-Analyse . Die Nummerierung bezieht sich auf die
Proteinspots in Abb . 28 . Es wurden drei Phasen einer acetatlimitierten Fermentation von YYC2021dhA
verglichen . Von jeder Phase wurden drei unabhängige 2D-Gele angefertigt . Spalte n gibt an, in wieviel
der neun Gele die Proteinspots gefunden wurden . Die relative mittlere Proteinintensität gibt den
Mittelwert der Proteinintensität nach 8 h, 12 h und 35 h an . Die molekulare Masse M (in kDa) und der
pl wurden aus der Colibri-Datenbank entnommen (http ://genolist.pasteur .fr/Colibri/) . Bei den
Proteinen, bei denen keine Zuordnung durch Peptidmassenfingerprint-Analyse möglich war, wurden
Masse und pl aus dem 2D-Gel abgeschätzt . n .n . = nicht nachweisbar
Nr. B Gen Beschreibung n relative mittlere M pl
Glykolyse und Pentose-Phosphat-Weg
Proteinintensität
8h 12h 35h
3 b2925 fbaA Fructose-Bisphosphat-Aldolase 7 3,4 1,4 0,6 39,0 5,5
5 b2029 gnd Gluconat-6-Phosphat-Dehydrogenase 9 4,5 6,1 7,3 51,3 4,9
Citratzyklus
11 b1136 icd Isocitrat-Dehydrogenase (phosphoryliert) 6 1,5 n .n . 2,0 45,6 5,0
13 b1136 icd Isocitrat-Dehydrogenase (dephosphoryliert) 9 10,9 5,0 5,4 45,6 5,0
6 b3236 mdh Malat-Dehydrogenase 9 3,3 1,9 1,6 32,2 5,5
Stressproteine
10 b0014 dnak Chaperon 9 5,2 5,4 7,7 68,9 4,6
17 b1237 hns DNA-Bindeprotein 9 2,6 4,0 3,9 15,4 5,2
16 b2579 yfiD Radikalprotein, induziert durch Säurestress 9 1,8 3,3 0,8 14,1 4,9
8 b3495 uspA Universelles Stressprotein 9 3,1 4,1 5,0 15,9 4,9
22 b3517 gadA Glutamat-Decarboxylase 8 5,5 2,6 2,1 52,5 5,0
Aminosäure-Stoffwechsel