Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

ERGEBNISSE 93
Kulturüberstand), mitten in der Pyruvat-Produktionsphase nach 12 h (216 mM Pyruvat) und
am Ende der Fermentation nach 35 h (243 mM Pyruvat) (Abb . 28) . Von den Proben der drei
Zeitpunkte wurden jeweils drei 2D-Gele angefertigt . In Abb . 29 sind exemplarisch zwei
solcher 2D-Gele zu verschiedenen Zeitpunkten dargestellt . Die identifizierten Proteinspots
sind durch Pfeile gekennzeichnet . Unterschiede im Proteinmuster wurden mittels der
ProteomWeaver-Software (Definiens Imaging GmbH, München) identifiziert und
quantifiziert . Dazu wurden die relativen Intensitäten der einzelnen Proteine (Anteil an der
Gesamtintensität aller Spots auf dem Gel) von den drei Gelen eines Zeitpunkts gemittelt und
mit den gemittelten Werten der beiden anderen Zeitpunkte verglichen .
a)
U
a
20 -
5-
0
0 10 20 30
Zeit (h)
Abb . 28 : Fed-Batch-Kultivierung von E. coli YYC2021dhA in Minimalmedium mit online-Regulation der
Glucose- und Acetat-Zugabe . Die Sauerstoffsättigung betrug immer >_ 40 %, der pH wurde konstant
bei 7 gehalten . Es wurden folgende Symbole verwendet : Glucose ("), Pyruvat (A), Lactat (0), Acetat
( " ), OD600 (O) . Die Probennahme für die Proteomanalyse erfolgte zu den angegebenen Zeitpunkten
1 (7,8 h), 2 (11,9 h) und 3 (34,9 h) .