Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

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1 .1 Bestätigung der Acetat-Auxotrophie von YYC202
In Abb . 6 ist das aerobe Wachstum von E. coli YYC202 in M9-Glucose-Minimalmedium
ohne bzw . mit 2 mM Acetat gezeigt . In Anwesenheit von 2 mM Acetat hatte YYC202 eine
Wachstumsrate von 0,37 h -1 und eine End-OD600 von 0,7, während in
Abwesenheit von Acetat kein Wachstum erkennbar war . Somit konnte die Acetat-
Auxotrophie von YYC202 bestätigt werden . Es wurde außerdem festgestellt, dass YYC202
nicht auf Acetat als alleiniger C-Quelle wachsen kann . Eine mögliche Ursache für diesen
Phänotyp könnte ein fehlender oder reduzierter Glyoxylatzyklus sein (siehe 7 .1 und 7 .2 bzw .
8 .1)
1 .0 -
0.8 -
0 0.6 -
0
O 0.4 -
0.2 -
0.0 -
0 2 4 6 8
Zeit (h)
Abb. 6 : Wachstum von E. coli YYC202 in M9-Glucose-Minimalmedium (10 mM Glucose) ohne (O)
bzw . mit 2 mM Na-Acetat (" ) .
1 .2 Co-Verstoffwechselung von Glucose und Acetat durch E. coli YYC202
ERGEBNISSE
Bei Wachstum auf Glucose und Acetat verwertet E. coli die beiden C-Quellen nicht
gleichzeitig, sondern setzt zuerst Glucose und anschließend das Acetat um (Walsh &
Koshland, 1984 ; Walsh & Koshland, 1985) . Für das Wachstum auf Acetat als einziger C-
Quelle ist der Glyoxylatzyklus als anaplerotische Reaktion essentiell . Bei fehlendem
Glyoxylatzyklus würde Acetat durch den Citratzyklus vollständig zu CO Z umgesetzt und es
ständen keine Intermediate des Citratzyklus für Biosynthesen und Gluconeogenese zur
Verfügung . Etwa ein Drittel des gesamten Kohlenstoffes wird bei Wachstum auf Acetat durch
den Glyoxylatzyklus geleitet . Die Schlüsselenzyme des Glyoxylatzyklus, Isocitrat-Lyase und
Malat-Synthase, unterliegen einer Glucose-Repression (Walsh & Koshland, 1985) . Im