Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...
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60 ERGEBNISSE<br />
als C-Quelle eingesetzt. Wie in Abb . 18 dargestellt, wirkte <strong>Pyruvat</strong> in Konzentrationen<br />
>250 mM stark hemmend auf das Wachstum, unabhängig davon, ob es als Na- oder K-Salz<br />
eingesetzt wurde . Ab 500 mM war praktisch kein Wachstum mehr nachweisbar . Einen<br />
Einfluss des pH-Wertes kann ausgeschlossen werden, da er während der gesamten<br />
Kultivierung konstant bei pH 7 blieb . Demgegenüber war das Wachstum in Glycerin-<br />
Minimalmedium bei Zusatz von 500 mM NaCI oder KCI deutlich weniger beeinträchtigt .<br />
Dies spricht dafür, dass die <strong>Produktion</strong>sgrenze von circa 700 MM <strong>Pyruvat</strong> sowohl <strong>durch</strong><br />
osmotischen als auch <strong>durch</strong> einen pyruvatspezifischen Stress bedingt ist . Bei den<br />
Fermentationen <strong>durch</strong> B . Zelic konnte gezeigt werden, dass YYC202ldhA-Zellen, die nach<br />
der <strong>Pyruvat</strong>-<strong>Produktion</strong> in frisches Minimalmedium mit Glucose und Acetat überimpft<br />
wurden, wieder in der Lage waren <strong>Pyruvat</strong> zu produzieren .<br />
0<br />
c<br />
W<br />
2 .0<br />
1 .0<br />
0 .5<br />
0 .0<br />
0 .4<br />
0 .3<br />
0 .2<br />
0 .1<br />
0 .0<br />
B<br />
0 200 400 600 800 1000<br />
[MM]<br />
Abb . 18 : Einfluss verschiedener Konzentrationen (10, 50, 100, 250, 500, 750 und 1000 mM) von Na-<br />
<strong>Pyruvat</strong> (A), K-<strong>Pyruvat</strong> ( " ), NaCI (0) und KCI (O) auf das Wachstum von E. coli MG1655 in M9-<br />
Minimalmedium . Für die Versuche mit NaCI und KCI wurde 50 mM Glycerin als C-Quelle eingesetzt .<br />
Die Mittelwerte wurden aus zwei unabhängigen Experimenten ermittelt . A . End-OD 600 nach 25 h<br />
Inkubation bei 37C und 140 U .p .m . ; B . maximale Wa chstumsrate (lamax) .