Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

ERGEBNISSE 73
Abb . 25 : Wachstum von YYC202-pGS87 und YYC202-pBR322 auf Minimalmedium mit 10 mM
Glucose (links) bzw . auf Minimalmedium mit 10 mM Glucose und 2 mM Acetat (rechts) .
0
10
5
0
A
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
Zeit (h) Zeit (h)
Abb . 26 : Wachstum (O), Glucose- (") und Acetat-Umsetzung (" ) sowie Pyruvat-Bildung (A) bei
Kultivierung von YYC202-pBR322 (A) bzw . YYC202-pGS87 (B) in M9-Minimalmedium mit -10 mM
Glucose und -2 mM Acetat . Die Pyruvat-Ausbeute von YYC202-pBR322 betrug -1,6 Mol Pyruvat/Mol
Glucose . YYC202-pGS87 bildete kein Pyruvat .
0.8
0.6 g
0
O
0.4
Die Stämme wurden in M9-Minimalmedium mit 10 mM Glucose und 2 mM Acetat
kultiviert . Unter diesen Bedingungen produziert YYC202-pBR322 Pyruvat, nicht aber
YYC202-pGS87 . Die Kultivierung erfolgte über vier Tage (-200 Generationen) durch
fünfmaliges Überimpfen, um eine Adaptation an das entsprechende Medium zu
gewährleisten . Die Kulturen zur Isolierung von RNA wurden bei einer OD6 00 zwischen 0,2
und 0,4 in der exponentiellen Phase geerntet. Die Zellen hatten eine durchschnittliche
Wachstumsrate von 0,47 h-1 (YYC202-pBR322) bzw . 0,50 h-1 (YYC202-pGS87) . Die
Auswertung der DNA-Chips ergab, dass 27 Gene in YYC202-pBR322 eine >3-fach erhöhte
mRNA-Menge gegenüber YYC202-pGS87 besaßen und 24 Gene eine >3-fach reduzierte
mRNA-Menge (Tab . 14) .
0.2
0.0