Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...
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ERGEBNISSE 47<br />
1 .6-<br />
1 .2 -<br />
c 0 .8 -<br />
O<br />
0.4-<br />
0.0-<br />
0 2 4 6 8<br />
Zeit (h)<br />
Abb . 10 : Wachstum von YYC202 in M9-Minimalmedium mit 10 mM Glucose und verschiedenen<br />
Acetat-Konzentrationen . Es wurden 0 mM (O), 2 mM (O), 4 mM ( " ), 6 mM (A) bzw . 10 mM (")<br />
Acetat zugesetzt .<br />
Tab . 8 : Maximale Wachstumsrate, OD600 und <strong>Pyruvat</strong>-Ausbeute von E. coli YYC202 in M9-<br />
Minimalmedium mit 10 mM Glucose und verschiedenen Acetat-Konzentrationen .<br />
Acetat-Konzentration Maximale OD600 Maximale<br />
Wachstumsrate<br />
<strong>Pyruvat</strong>-Ausbeute<br />
(Mol <strong>Pyruvat</strong>/Mol Glucose)<br />
1 mm 0,6 0,45 h- 1,7<br />
2 mM 1,0 0,69 h-1 1,5<br />
6 mM 1,2 0,77 h-1 1,4<br />
10 mm 1,5 0,81 h-1 1,3<br />
2 .3 Einfluss der Glucose-Konzentration auf Wachstum und <strong>Pyruvat</strong>-<strong>Produktion</strong><br />
Um den Einfluss höherer Glucosekonzentrationen auf das Wachstum und die <strong>Pyruvat</strong>-<br />
Bildung von YYC202 zu untersuchen, wurden Wachstumsversuche in M9-Minimalmedium<br />
mit 60 mM Glucose und 11 mM Acetat sowie mit 106 mM Glucose und 21 mM Acetat<br />
<strong>durch</strong>geführt . In Abb . 11 ist exemplarisch die Glucose-Umsetzung bei 106 mM dargestellt . Es<br />
stellte sich heraus, dass die zugesetzte Glucose nicht vollständig verbraucht wurde . Die<br />
Bildung von <strong>Pyruvat</strong> (pKa 2,5) und Lactat (pKa 3,9) führte zu einer Ansäuerung des Mediums<br />
von pH 7,0 auf pH 5,0, was den Glucose-Verbrauch stoppte und eine Hemmung des<br />
Wachstums bewirkte . Außerdem sank im Vergleich zu dem in 2 .1 dargestellten Experiment