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Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

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ERGEBNISSE 47<br />

1 .6-<br />

1 .2 -<br />

c 0 .8 -<br />

O<br />

0.4-<br />

0.0-<br />

0 2 4 6 8<br />

Zeit (h)<br />

Abb . 10 : Wachstum von YYC202 in M9-Minimalmedium mit 10 mM Glucose und verschiedenen<br />

Acetat-Konzentrationen . Es wurden 0 mM (O), 2 mM (O), 4 mM ( " ), 6 mM (A) bzw . 10 mM (")<br />

Acetat zugesetzt .<br />

Tab . 8 : Maximale Wachstumsrate, OD600 und <strong>Pyruvat</strong>-Ausbeute von E. coli YYC202 in M9-<br />

Minimalmedium mit 10 mM Glucose und verschiedenen Acetat-Konzentrationen .<br />

Acetat-Konzentration Maximale OD600 Maximale<br />

Wachstumsrate<br />

<strong>Pyruvat</strong>-Ausbeute<br />

(Mol <strong>Pyruvat</strong>/Mol Glucose)<br />

1 mm 0,6 0,45 h- 1,7<br />

2 mM 1,0 0,69 h-1 1,5<br />

6 mM 1,2 0,77 h-1 1,4<br />

10 mm 1,5 0,81 h-1 1,3<br />

2 .3 Einfluss der Glucose-Konzentration auf Wachstum und <strong>Pyruvat</strong>-<strong>Produktion</strong><br />

Um den Einfluss höherer Glucosekonzentrationen auf das Wachstum und die <strong>Pyruvat</strong>-<br />

Bildung von YYC202 zu untersuchen, wurden Wachstumsversuche in M9-Minimalmedium<br />

mit 60 mM Glucose und 11 mM Acetat sowie mit 106 mM Glucose und 21 mM Acetat<br />

<strong>durch</strong>geführt . In Abb . 11 ist exemplarisch die Glucose-Umsetzung bei 106 mM dargestellt . Es<br />

stellte sich heraus, dass die zugesetzte Glucose nicht vollständig verbraucht wurde . Die<br />

Bildung von <strong>Pyruvat</strong> (pKa 2,5) und Lactat (pKa 3,9) führte zu einer Ansäuerung des Mediums<br />

von pH 7,0 auf pH 5,0, was den Glucose-Verbrauch stoppte und eine Hemmung des<br />

Wachstums bewirkte . Außerdem sank im Vergleich zu dem in 2 .1 dargestellten Experiment

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