Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

ERGEBNISSE 43
folgenden wurde die Umsetzung von Glucose und Acetat durch die E. coli-Stämme MG1655
und YYC202 verglichen .
Wie in Abb . 7 dargestellt, zeigte MG1655 das in der Literatur bereits beschriebene
Verhalten, d .h . zunächst wurde nur die Glucose umgesetzt und dabei Acetat gebildet und erst
nach Verbrauch der Glucose wurde Acetat umgesetzt . Dies führte zu dem klassischen
diauxischen Wachstumsverlauf . Demgegenüber setzte YYC202 Glucose und Acetat von
Beginn des Wachstum an parallel um. Die Wachstumskurve war folglich nicht diauxisch . Die
deutliche geringere End-OD wird durch die starke Pyruvat-Bildung bedingt (siehe unten) . Die
parallele Verstoffwechselung von Glucose und Acetat durch YYC202, die aufgrund der zuvor
beschriebenen Acetat-Auxotrophie erwartet worden war, zeigt, dass die im Wildtyp
funktionierenden Regulationsmechanismen in YYC202 ausgeschaltet sein müssen . Ob der
Glyoxylatzyklus unter den genannten Bedingungen aktiv ist, wurde nicht getestet. Auffällig
war, dass nach Verbrauch der Glucose das Wachstum stoppte, obwohl noch 4 mM Acetat
vorhanden war und auch verstoffwechelt wurde .
E
91-
2
â)
Q aï
0
U
C3
16
14
12
10
8
6
4
2
0
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Abb. 7 : Vergleich der Umsetzung von Glucose (" , -11 mM) und Acetat (" , -12 mM) durch MG 1655
(A) und YYC202 (B) bei Wachstum (OD6oo, O) in Minimalmedium . MG1655 setzte die Glucose mit
einer maximalen Rate von 4,2 gmol min - ' (mg Protein) - ' um . Acetat wurde zunächst mit einer
maximalen Rate von 1,3 gmol min- ' (mg Protein) -' gebildet und anschließend mit einer maximalen