Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...
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MATERIAL UND METHODEN 13<br />
Plasmid Merkmale Größe Referenz<br />
pGS87 pBR322-Derivat mit einem -10,2-kb Hindlll- 13,9 kb (Spencer & Guest,<br />
4 Oligonukleotide<br />
al ., 1985)<br />
Die Oligonukleotide, die bei Standard- und Kolonie-PCR eingesetzt wurden, sind in Tab . 3<br />
aufgeführt .<br />
Sall-Fragment aus E. coli, das die aceEF-lpd- 1985)<br />
Region enthält .<br />
pKNG101 SmR , oriR6K mobRK2 sacBR, Suizidvektor, 6,8 kb (Kaniga et al., 1991)<br />
der in E. coli und anderen gram-negativen<br />
Bakterien nur in Anwesenheit des Pir-Proteins<br />
replizieren kann .<br />
pKNG101- pKNG101-Derivat mit einem 8-kb-Apal- 14,8 kb Diese Arbeit<br />
Tn5 Fragment aus pRJ3405 mit dem Tn5-<br />
Transposon .<br />
pK03 CraR, Klonierungsvektor für die Konstruktion 5681 bp (Link et al., 1997)<br />
von Insertions- und Deletionsmutanten von E.<br />
coli .<br />
pK03-ldhA pK03-Derivat mit einem 1,2-kb-"Crossover"- 6901 bp Diese Arbeit<br />
PCR-Fragment in den BamHI-Schnittstellen,<br />
das die ldhA-flankierenden Bereiche umfasst<br />
pRJ3405 AmpR , KanR, SmR , Tn5-tragendes 8-kb- 11,0 kb (Bott et al., 1991)<br />
EcoRI-Fragment aus Bradyrhizobium<br />
japonicum COX122 in pBluescript KS+<br />
PUC18 AmpR , Klonierungsvektor 2686 bp (Yanisch-Perron et<br />
Tab . 3 (nächste Seite) : Sequenzen der Oligonukleotide, die in dieser Arbeit verwendet wurden . Alle<br />
Sequenzen sind in 5"--->3"-Richtung dargestellt . Restriktionsschnittstellen, die mit Hilfe der<br />
Oligonukleotide eingeführt wurden, sind <strong>durch</strong> Fettdruck hervorgehoben, und das entsprechende<br />
Enzym ist in der letzten Spalte angegeben .
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