Pyruvat-Produktion durch acetatauxotrophe - JUWEL ...

44 ERGEBNISSE
Rate von 0,6 gmol min - ' (mg Protein) - ' wieder umgesetzt . Pyruvat wurde nicht gebildet . YYC202
setzte Glucose mit einer maximalen Rate von 3,7 gmol min- ' (mg Protein) - ' um und Acetat mit einer
maximalen Rate von 2,8 gmol min- ' (mg Protein) -1 . Pyruvat (A) wurde mit einer maximalen Rate von
3,9 gmol min- ' (mg Protein) - ' gebildet. Die Proteinkonzentration zur Bestimmung der spezifischen
Raten wurde nach folgender Formel berechnet : OD 600 = 1,4 =-- 0,15 mg Protein/ml .
1 .3 Acetat-Toleranz von E. coli YYC202
Untersuchungen mit dem E. coli-Wildtyp-Stamm MG1655 ergaben, dass Acetat-
Konzentrationen >10 mM die Wachstumsrate und die Zellausbeute verringern (V . Wendisch,
persönliche Mitteilung) . Um zu überprüfen, ob diese Effekte auch bei dem acetatauxotrophen
Stamm YYC202 auftreten, wurde das Wachstum in LB-Medium mit verschiedenen Acetat-
Konzentrationen getestet .
L
5
4
p 3
O
w 2
0
0.8
0.4
0.0
A
B
0 50 100 150 200
Acetat[m M]
Abb. 8 : Vergleich der End-OD600 (A) und der maximalen Wachstumsrate (gmax, B) von MG1655 (O)
und YYC202 (A) bei Wachstum auf LB-Medium mit unterschiedlichen Na-Acetat-Konzentrationen . Die
Stämme wurden in 500-ml-Erlenmeyerkolben mit zwei Schikanen und 50 ml LB-Medium bei 37C und
140 U .p.m . inkubiert .
Wie in Abb . 8 zu sehen, gab es sowohl bezüglich der Zellausbeute als auch bezüglich der
Wachstumsrate sehr deutliche Unterschiede zwischen MG1655 und YYC202 . Niedrige
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