RCGI V31 N63

COMUNICACIÓN CORTA BIOTECNOLOGÍA ALIMENTARIA
REVISTA DEL CENTRO DE GRADUADOS E INVESTIGACIÓN. INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MÉRIDA. Vol. 31 NÚM. 63. PP. 167 – 168 OCT. 2016 ISSN 0185-
6294
CARACTERIZACIÓN DE BACTERIAS NATIVAS DEL PEPINO DE MAR Isostichopus badionotus CON
CAPACIDAD ANTAGÓNICA ANTE MICROORGANISMOS DE TRANSMISIÓN ALIMENTARIA
María José Sánchez 1,2 , Víctor Toledo 1 , Mariel Gullian 2
1
Instituto Tecnológico de Mérida, Av. Tecnológico Km 4.5 colonia Plan de Ayala C.P.97118 Mérida, Yuc.
2
Universidad Marista de Mérida, Periférico Norte Tablaje Catastral 13941 Carretera Mérida-Progreso. C.P. 97300 Mérida, Yucatán.
Autor de contacto: Maryjoenice@hotmail.com
Recibido: 30/agosto/2016 Aceptado: 29/septiembre/2016 Publicado: 19/octubre/2016
Palabras clave: Pepino de mar, bacterias.
INTRODUCCIÓN
En los años 90´s, varios componentes bioactivos se han sido
extraídos de especies marinas como los corales (1), cangrejos
y equinodermos, incluyendo algunas especies de pepinos de
mar japonesas. El pepino de mar es un animal que pertenece
al Phylum Equinodermata del cual se han obtenido
componentes que poseen actividad biológica como toxicidad,
antibacterial, antifúngica, antiviral y antitumoral (2), pero
también posee microorganismos que de manera natural viven
en su piel.
El objetivo del trabajo fue determinar el género de las
bacterias con actividad antagónica presentes en el mucus del
pepino de mar Isostichopus badionotus.
MATERIAL Y MÉTODOS
Las bacterias marinas se aislaron del pepino de mar
Isostichopus badionotus en el año 2013, se mantuvieron en
agar marino, identificaron morfológica, topográfica y
bioquímicamente en placa y tubos de cultivo. Se realizó un
análisis de antagonismo microbiano ante bacterias patógenas
humanas (3). Posteriormente se realizó una extracción de
ADN de las bacterias con actividad antagónica positiva (4),
una reacción en cadena de la polimerasa (PCR),
cuantificación de ADN (QuantiFluor® dsDNA System
PROMEGA), secuenciación (LANGEBIO-CINVESTAV);
con la información obtenida de la secuenciación se comparó
con la base de datos del Centro Nacional de Información
Biotecnológica (NCBI) a través de la herramienta de
búsqueda para alineamiento local (BLAST), arrojando un
resultado y en base a este se procedió a la PCR utilizando
primers específicos para el género al cual se quería evaluar.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Se aislaron bacterias marinas del mucus del pepino de mar en
el mes de Octubre del 2013, de las cuales 5 presentan
capacidad antagónica ante las bacterias patógenas
Escherichia coli y Staphylococcus aureus (4).
En el cuadro 1 se puede observar que todas las bacterias con
capacidad antagónica son del género Bacillus, de acuerdo a
la herramienta BLAST; lo que nos llevó a una confirmación
a través del producto de la PCR con los primers específicos
para dicho género [BalF (5’- TGCAACTGTATTAGCACA
AGC T -3’) y BalR (5’- TACCACGAAGTTTGTTCACTCT
-3’)] con un peso de 533 pares de bases (bp) como se observa
en la Figura 1. En dicha figura se refuerza el resultado del
género únicamente en 3 de las bacterias, por lo que no hubo
amplificación en 2 de ellas.
Cuadro 1. Resultados de la similitud de bacterias ante la base de datos de la
herramienta BLAST
Código original de
la bacteria
Porcentaje de similitud Bacteria similar
27-B I/I 96 % Bacillus anthracis
27-A F/I 96 % Bacillus cereus
25-A L/D/L 98 % Bacillus spp.
6-B F/R/P 97 % Bacillus anthracis
25-A F/P 70 % Bacillus cereus
Fig. 1. Resultado de PCR de bacterias marinas amplificadas con primers del
género Bacillus. A: 6-B F/R/P, B: 25-A F/P, C: 27-B I/I, D: 27-A F/I, E: 25-
A L/D/L.
CONCLUSIONES
El 60% de las bacterias aisladas del pepino de mar
Isostichopus badionotus con actividad antagónica ante
patógenos alimentarios humanos pertenecen al género
Bacillus. Es necesario reforzar este resultado con una
secuenciación de dicho producto de PCR:
AGRADECIMIENTOS
Se agradece el financiamiento al proyecto FOMIX-
CONACYT (M026-169961), a la Universidad Marista de
Mérida e Instituto Tecnológico de Mérida.
T E C N O L Ó G I C O N A C I O N A L D E M É X I C O . I. T. M É R I D A