RCGI V31 N63

MICROPROPAGACIÓN DE CLONAS REGENERADAS A PARTIR DE LOS EXPLANTES DE HIPOCÓTILO DE CUATRO MORFOTIPOS DE BIXA ORELLANA
como la aplicación de fotoperíodo lo cual determina la
eficacia en la micropropagación de Bixa orellana, sin
embargo, estos procesos son muy tardados y de alto costo.
En este trabajo, se desarrolló un método rápido, eficaz y de
bajo costo para la producción masiva de plantas completas
de achiote a partir de explantes de hipocótilo de un solo
individuo, obtenido de semilla germinada in vitro, con la
finalidad de asegurar la producción de individuos
genéticamente idénticos, para establecer plantaciones y
evaluar condiciones agronómicas que permita aumentar el
contenido de bixina.
MATERIAL Y MÉTODOS
Las semillas de cuatro morfotipos (peruana roja, peruana
verde, NE y YUC) de achiote se germinaron in vitro, en
medio PC-L2 semisólido, para obtener los explantes de
hipocótilos. Los cuales se emplearon para inducir la
formación de callos-brotes de cada morfotipo con 1 mg/L
BAP. Los brotes obtenidos a partir de explantes de hipocótilo
se separaban en frascos individuales y se hacían proliferar in
vitro, añadiéndoles medio PC-L2 líquido suplementado con
la misma concentración de BAP. Para la formación de raíces
se utilizó una concentración de 1.5 mg/L de IBA y como
fuentes de carbono, sacarosa comercial.
obtenidos en los cuatro morfotipos de B. orellana, siendo el
promedio del conteo de diez líneas celulares cada 30 días
durante tres periodos, obteniendo 7, 5, 2 y 1 brotes por cada
explante para la variedad cápsula roja, cápsula verde,
variedad NE y la variedad YUC, respectivamente. Los brotes
generados con 2 cm de longitud eran individualizados en
frascos con el mismo medio y se les añadió medio líquido
PC + 1mg/L de BAP para su proliferación in vitro (Figura 4).
Cuadro 1. Número de brotes de los cuatro morfotipo de B. orellana
(promedio de tres periodos de 30 días)
Morfotipo
Período Período Período Promedio al final
1 2 3 de los períodos
Cápsula
Roja
4.7 3.5 15.5 7.9
Cápsula
Verde
2.7 3.6 9.9 5.4
Variedad
NE
2.1 2.2 3.5 2.6
Variedad
YUC
0.8 1.0 3.12 1.6
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Germinación de semillas de Bixa orellana: Las semillas
germinaron a los 30 días posteriores a su asepsia. Plántulas
con aproximadamente 4 cm. de altura, y un buen desarrollo
de raíces adventicias, fueron la fuente de explantes de
hipocótilos de los 4 morfotipos (Figura 2).
Figura 3. Proliferación de Bixa orellana en medio PC semisólido
complementado con BAP 1mg/L del morfotipo capsula roja en tres
periodos de 30 días cada uno. A (1 mes), B (2 meses), C (3 meses).
Figura 2. Plantas germinadas de B. orellana con 30 días de edad
(variedad capsula roja)
Inducción de la formación de callos-brotes in vitro:
Segmentos de hipocótilo de 1 cm de longitud dieron lugar a
la formación de callos-brotes en aproximadamente 60 días
(variedad verde y roja) y 90 (variedad NE y YUC)
posteriores a su inducción BAP 1mg/L. Los resultados
muestran una mayor producción de brotes en el morfotipo
cápsula roja (Figura 3) seguida de la cápsula verde, mientras
que NE y YUC presentan un lento crecimiento, siendo el de
menor velocidad este último. Los datos de esta evaluación se
describen en el cuadro 1, donde se presenta los brotes
Figura 4. Proliferación de brotes en medio líquido complementado
con BAP 1 mg/L del morfotipo cápsula roja.
Formación de raíces: Brotes obtenidos de alrededor de 4 cm de
longitud formaron raíces con la adición de 1.5 mg/L de IBA a
los 21 días siguientes (ver figura 5).
Aclimatación de plantas: Las plantas completas con
aproximadamente 4-5 cm de longitud se sometieron a
proceso de aclimatación utilizando bolsa de plástico en
maceta (substrato: agrolita y tierra roja 1:1), estas mismas
70 REVISTA DEL CENTRO DE GRADUADOS E INVESTIGACIÓN. INSTITUTO TECNOLÓGICO MÉRIDA Vol. 31 NÚM. 63