RCGI V31 N63

ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN BIOTECNOLOGÍA VEGETAL
REVISTA DEL CENTRO DE GRADUADOS E INVESTIGACIÓN. INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MÉRIDA. Vol. 31 NÚM. 63. PP. 54– 57 OCT. 2016 ISSN 0185-6294
VARIACIÓN SOMACLONAL EVALUADO MEDIANTE MARCADORES MOLECULARES EN LA
REGENERACIÓN IN VITRO DE BANANO CV. MANZANO
Pablo López-Gómez 1* , Rosa María Escobedo-GraciaMedrano 2 , Muhammad Youssef 3 , Adrián J. Enríquez-Valencia 2 , Roberto
Ku-Cahuich 2 , Leobardo Iracheta-Donjuan 1
1
Campo Experimental Rosario Izapa, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias, km 18 Carretera Tapachula-Cacahoatán,
Tuxtla Chico, Chiapas, México, C.P. 30870.
2
Unidad de Bioquímica y Biología Molecular de Plantas, Centro de Investigación Científica de Yucatán, Calle 43, 130, Colonia Chuburná de Hidalgo,
Mérida, Yucatán, C. P. 97200.
3
Departamento de Genética, Facultad de Agricultura, Universidad de Assiut, Egipto. *
Autor de contacto: lopez.pablo@inifap.gob.mx
Recibido: 30/agosto/2016 Aceptado: 29/septiembre/2016 Publicado: 19/octubre/2016
RESUMEN
En este estudio se ha investigado la variación somaclonal de plantas regeneradas in vitro mediante embriogénesis somática
indirecta y mediante organogénesis directa a partir de explantes de yemas florales en proliferación obtenidos de una sola
planta madre, utilizando marcadores tipo ISSR, SRAP e ITAP. Las flores masculinas inmaduras de M. a. x M. b. (AAB, Silk)
cv. Manzano sirvieron de explante inicial para la regeneración in vitro de plantas mediante OD y ESI por dos vías, ESI-1 y
ESI-2. El polimorfismo entre plantas regeneradas por OD del cv. Manzano fue de 36.3, 19.5 y 13.7% con marcadores ISSR,
SRAP e ITAP, respectivamente; para ESI-1 fue de 22.9, 12.5 y 11.4%, respectivamente y para ESI-2 fue de 54.7, 24.2 y
12.3% respectivamente. El polimorfismo en conjunto de las plantas regeneradas por OD, ESI-1 y ESI-2, resultaron de 21.2,
14.8 y 27.1% al combinar los tres sistemas de marcadores evaluados (ISSR, SRAP e ITAP). En este trabajo se discuten los
factores evaluados para la regeneración in vitro y su influencia en la variación observada.
Palabras clave: Embriogénesis somática indirecta, organogénesis directa, ISSR, SRAP, ITAP.
Abstract. We investigated somaclonal variation in regenerants of bananas derived from in vitro indirect somatic
embryogenesis and direct organogenesis from floral buds of only one mother plant, using inter simple sequence repeat (ISSR),
sequence-related amplified polymorphims (SRAP) and intron targeted amplified polymorphism (ITAP) analysis. Inmature
male flowers of M. a. x M. b. (AAB, Silk) cv. Manzano were employed as initial explant for in vitro plant regeneration via
direct organogenesis (OD) and indirect somatic embryogenesis (ESI) in two ways, ESI-1 and ESI-2. The polymorphism
between plants regenerated by OD in cv. Manzano was 36.3, 19.5 and 13.7% respectively; ESI-1 was 22.9, 12.5 and 12.3%,
respectively and ESI-2 was 54.7, 24.2 and 12.3% respectively. The polymorphism of plants regenerated by OD, ESI-1 and
ESI-2, result in 21.2, 14.8 and 21.1% at combine the three molecular systems evaluated (ISSR, SARP and ITAP). Factors
evaluated for in vitro regeneration and its influence on the observed variation was discussed.
Keywords: indirect somatic embryogenesis, direct organogenesis, ISSR, SRAP, ITAP.
INTRODUCCIÓN
La herramienta más utilizada para la propagación de especies
vegetales es la organogénesis, debido a que ha mostrado
mayor estabilidad genética entre los regenerantes. No
obstante, existen reportes recientes que sostienen lo contrario
(Sheidai et al. 2008; Mohamed 2007; Bairu et al. 2006);
aunque, en estos trabajos, las rutas morfogénicas han sido
evaluados por separado. Recientemente, se describió una
metodología de embriogénesis somática en Musa acuminata
Colla, AAA, subgrupo Cavendish, cv. Dwarf Cavendish, que
usa flores masculinas jóvenes, para la formación de nuevas
yemas florales y su proliferación in vitro (Pérez-Hernández
y Rosell-García 2008). Estos tejidos se pueden emplear como
explantes para la inducción tanto de embriogénesis somática
o de la organogénesis, para la obtención de brotes de manera
directa (Darvari et al. 2010). Tanto en propagación clonal y
como apoyo al mejoramiento genético, un método de
detección temprana de variantes somaclonales para estudiar
la fuente de variación es deseable. El uso de herramientas
moleculares representa uno de los métodos más confiables
para este tipo de estudios (Aremu et al. 2013; Bairu et al.
2011). En banano, los ISSR (regiones internas de secuencias
simples repetidas), se han aplicado para estudios de
diversidad genética, filogenéticos, ecología y evolución
(Aruna et al. 2012; Chandrika et al. 2010; Bahulikar et al.
2004). Producto de la investigación en genómica funcional
en plantas se han desarrollado nuevas técnicas que se basan
en la amplificación de regiones relacionadas a genes. Entre
ellos están el polimorfismo amplificado de secuencias
relacionas (SRAP) y el polimorfismo amplificado dirigido a
intrones (ITAP). La pregunta de este trabajo fue ¿cuál es el
nivel de variación genética que inducen los sistemas de
regeneración in vitro, más empleados en banano? Con base
en lo anterior, el presente trabajo tuvo como objetivo llevar a
T E C N O L Ó G I C O N A C I O N A L D E M É X I C O . I. T. M É R I D A