RCGI V31 N63

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COMUNICACIÓN CORTA BIOTECNOLOGÍA DE FERMENTACIONES REVISTA DEL CENTRO DE GRADUADOS E INVESTIGACIÓN. INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MÉRIDA. Vol. 31 NÚM. 63. PP. 180 – 181 OCT. 2016 ISSN 0185-6294 EXTRACTOS FENOLICOS DE SALVADO DE TRIGO: PRODUCCIÓN Y SU ACCION MEDIADORES REDOX DE LACASAS FUNGICAS COMO Pedro Manzanilla, Wendy Ancona, Jorge Tamayo, Gerardo Rivera y Sara Solís Pereira. División de Estudios de Posgrado e Investigación. Instituto Tecnológico de Mérida. Km 5 carretera Mérida-Progreso s/n. C.P. 97118. Tel (999)9645006. Autor de contacto: pedro_manzanilla23@hotmail.com Recibido: 30/agosto/2016 Aceptado: 29/septiembre/2016 Publicado: 19/octubre/2016 Palabras clave: fenoles, lacasas, salvado de trigo, mediadores, Trametes hirsuta Bm2 RESUMEN En este estudio se realizó la cinética de producción de lacasas y se obtuvieron extractos ricos en fenoles y un extracto rico en lacasa. Los extractos fenólicos incrementaron 2.26 veces la actividad de lacasas lo que sugiere su acción como mediador –redox. SUMMARY In this study was carried out kinetic of laccase production. Rich phenolic extracts and laccase extract were obtained. Phenolic extracts increased 2.26 times laccase activity. This result suggests their action as redox-mediator. Keyworks: phenols, laccases, wheat bran, mediators, Trametes hirsuta Bm2. INTRODUCCIÓN Los fenoles son moléculas heterogéneas presentes en la lignina de plantas. Este es un biopolímero fenólico complejo que solo los hongos de la podredumbre blanca son capaces de degradar liberando monómeros fenólicos a través de enzimas como las lacasas. Las lacasas son fenoloxidasas cuya inespecificidad les confiere una versatilidad catalítica para ser usadas en diversos procesos industriales (Rivera- Hoyos et al., 2013). La eficiencia de las enzimas puede ser incrementada por la adición de monómeros fenólicos que actúan como mediadores redox que le permiten amplíar el rango de sustratos sobre los que puede actuar la enzima (Cañas & Camarero, 2010). Los fenoles también pueden inducir la síntesis de lacasas cuando se adicionan al cultivo del hongo, por lo que es importante la obtención de extractos fenólicos (EF) naturales a partir de fuentes renovables como el salvado de trigo. Objetivo General. Obtener extractos fenólicos a partir de salvado de trigo y determinar su acción como mediadores redox y/o inductores de las lacasas. MATERIAL Y MÉTODOS Se realizaron cinéticas del cultivo sumergido de T. hirsuta Bm2con salvado de trigo al 3% a 35 °C a 150 rpm y 7 días. Se tomaron muestras cada 24 hr. Se determinó la actividad de lacasas (Coll et al., 1993) y fenoles totales (Singlenton & Rossi, 1965) en los extractos libres de células obtenidos a diferentes tiempos. Para determinar el efecto de los extractos fenólicos como mediadores redox, se adicionaron al sistema de reacción que contenía la enzima lacasa y ABTS como sustrato. También se evaluaron fenoles grado reactivo y los extractos fenólicos como sustratos de las lacasas en ausencia de ABTS. RESULTADOS Y DISCUSIÓN A partir del cultivo en salvado se obtuvieron curvas de producción de lacasas y fenoles totales. A tiempos cortos (0, 72h) se encontró alta concentración de fenoles (EF) y muy escasa actividad de lacasas, mientras que a las 144h se obtuvo un extracto rico en lacasa (EL) y pobre en fenoles. La adición de los EF al sistema reacción de lacasas (EL) con ABTS incrementó 2.26 veces la actividad de la enzima. Estos resultados coinciden con los reportados por Johannes y Majcherczy, 2000. La actividad de lacasa también se evaluó usando monómeros fenólicos grado reactivo y también EF como sustratos. En estas condiciones no hubo actividad, lo que indica que la enzima no los puede usar como sustratos y que los EF pueden actuar como mediadores redox o como activadores de la enzima lacasa. CONCLUSIONES El salvado de trigo es una fuente para la obtención de fenoles que incrementan la actividad de lacasas de T. hirsuta. Bm2. AGRADECIMIENTOS Al Conacyt por el financiamiento del proyecto 248295 y la beca otorgada. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Cañas, A. I., Camarero, S. (2010) Laccases and their natural mediators: Biotechnological tools for sustainable eco-friendly processes. Biotechnol. Adv. 28: 694–705. Coll, P.M., Fernandez-Avalos, J.M., Villanueva, J.R., Santamaria, R., Pérez, P. (1993) Purification and characterization of a phenoloxidase (laccase) from the lignin-degrading basidiomycete PM1 (CECT 2971). Appl. Environ. Microbiol. 59: 2607-2613. T E C N O L Ó G I C O N A C I O N A L D E M É X I C O . I. T. M É R I D A
EXTRACTOS FENOLICOS DE SALVADO DE TRIGO: PRODUCCIÓN Y SU ACCIÓN COMO MEDIADORES REDOX DE LACASAS FUNGICAS Johannes, C., Majcherczyk, A. (2000) Natural Mediators in the Oxidation of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons by Laccase Mediator Systems. Appl. Environ. Microbiol. 66: 524–528. Rivera-Hoyos, C. M., Morales-Álvarez, E. D., Poutou-Piñales, R. A., Pedroza-Rodríguez, A. M., Rodríguez-Vázquez, R., Delgado- Boada, J. M. (2013). Fungal laccases. Fungal Biol Rev. 27: 67-82. Singleton, V.L., Rossi, J.A.Jr. (1965). Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungtic acid reagent. Am. J. Enol. Vitic. 16: 144-158. REVISTA DEL CENTRO DE GRADUADOS E INVESTIGACIÓN. INSTITUTO TECNOLÓGICO MÉRIDA Vol. 31 NÚM. 63 181
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PREDICCIÓN BIOINFORMÁTICA Y VALID
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MADURACIÓN Y GERMINACIÓN IN VITRO
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