Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

Ausgehend von diesem Ergebnis konnte in der vorliegenden Arbeit zum ersten Mal
systematisch gezeigt werden, dass in humanen Endothelzellen nach einer
Stimulation mit C. albicans die verschiedenen Stufen der NF-κB-Signalkaskade
aktiviert werden. Es konnte sowohl die Aktivierung der IKK2 Kinase anhand der
Phosphorylierung von IκBα, als auch die anschließende Degradation von IκBα
dargelegt werden (Abbildung 4.11). Ebenso wurde die κB-abhängige
Gentranskription durch den aktivierten Transkriptionsfaktor demonstriert. Schließlich
konnte neben der Induktion von mRNA verschiedener NF-κB-Zielgene auch die
Expression der drei bekannten κB-Targets CXCL8, CCL20 und ICAM-1 auf
Proteinebene nachgewiesen werden. Durch Versuche mit HUVEC, in denen durch
stabile Expression einer dominant-negativen Mutante von IKK2 die NF-κB-
Signalkaskade unterbrochen wurde, konnte noch einmal im Umkehrschluss die
Bedeutung des NF-κB-Weges bestätigt werden. Nach Co-Kultur mit Candida wurde
eine ganze Reihe von Genen durch die Mutante deutlich gehemmt, und auch die
Expression der untersuchten κB-Targets CXCL8, CCL20 und ICAM-1 unterblieb in
den Zellen mit der mutierten IKK2 nach Stimulation mit dem Hefepilz weitestgehend
(vgl. Abbildungen 4.10 bis 4.16).
Mit den Untersuchungen zur Aktivierung der IKK/IκBα/NF-κB-Signalkaskade durch
C. albicans konnte klar bewiesen werden, dass dieser Signalweg tatsächlich aktiviert
wird und für die Induktion vieler Candida-regulierter Gene essentiell ist.
5.3 Eine Subgruppe C. albicans-induzierter Gene wird durch den p38 MAP
Kinase-Signalweg co-reguliert
Es konnte bereits früher gezeigt werden, dass die Expression von NF-κB-Zielgenen
in vielen Fällen der Co-Regulation durch mitogen-aktivierte Protein (MAP) Kinasen
unterliegt (Ashwell, 2006). Die Beteiligung insbesondere des p38 MAP Kinase-
Signalweges an der Induktion proinflammatorischer Chemokine wie beispielsweise
CXCL8 (IL-8) und CCL2 (MCP-1) in primären Endothelzellen durch verschiedene
Stimuli (TNFα und LPS) wurde schon detailliert beschrieben (Goebeler et al., 1999;
Hippenstiel et al., 2000). Ebenso wurde über die Beteiligung von p38 an der
Candida-vermittelten Induktion von Cyclooxygenase-2 in HeLa-Zellen berichtet
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