Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

Abbildung 4.15 Eine dominant-negative Mutante von IKK2 hemmt die C. albicans-induzierte
Expression von CXCL8 und CCL20 in HUVEC. HUVEC wurden retroviral entweder mit dem leeren
Vektor pCFG5-IEGZ (Kontrolle) oder demselben Vektor mit der Kinase-inaktivierten Mutante von IKK2
(IKK2KD) infiziert. Die stabil transduzierten Zellen wurden drei Tage lang mit Zeozin (250 µg/ml)
selektioniert, einen Tag in normalem Kulturmedium ohne Antibiotika kultiviert und anschließend für
acht Stunden mit C. albicans (MOI=1) oder TNFα (2 ng/ml) stimuliert bzw. nur mit Medium behandelt.
Zur Infektionskontrolle wurden die Lysate von Vektor-infizierten und IKK2KD-infizierten stimulierten
und unstimulierten Zellen im Western Blot auf Expression von IKK2KD hin untersucht. Als
Ladekontrolle diente eine Färbung auf ERK2 (A). Die Überstände der stimulierten bzw.
Medium-behandelten infizierten Zellen wurden mittels ELISA auf CXCL8 untersucht (oben). Die
Totalzelllysate wurden für eine ELISA-Untersuchung auf CCL20 verwendet (unten) (B). Für die
gezeigten Daten wurden die Werte aus sechs (CXCL8) bzw. vier (CCL20) Versuchen gemittelt, die
Fehlerbalken zeigen die Standardfehler (± SEM).
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