Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

transfizierten Zellen kaum beeinflusst, wohingegen eine Stimulation dieser Zellen mit
dem TLR4-Agonisten LPS verglichen mit den Kontrollzellen zu deutlich niedrigeren
CXCL8-Konzentrationen im Zellkulturüberstand und im Totalzelllysat führte. Wie
erwartet führte die Stimulation mit TNFα sowohl in den Kontroll-siRNA- als auch den
siRNA TLR4-transfizierten Zellen zu einer unbeeinflusst hohen CXCL8-Expression
(Abbildung 4.27 (A) und (B)).
Abbildung 4.27 Der Knock-down von TLR4 in HUVEC hemmt nicht die C. albicans-induzierte
CXCL8-Expression. HUVEC wurden mithilfe von Oligofectamine mit einer siRNA gegen TLR4 bzw.
einer Kontroll-siRNA transfiziert. Die Zellen wurden 48 Stunden später für acht Stunden mit
C. albicans (MOI=1), LPS (100 ng/ml) oder TNFα (2 ng/ml) stimuliert. Die Überstände aus drei
unabhängigen Versuchen wurden im CXCL8-ELISA untersucht (A). Dargestellt sind die normierten
Mittelwerte und Standardfehler. Die Totalzelllysate der stimulierten Zellen wurden im Western Blot auf
CXCL8 untersucht. Zur Ladekontrolle wurde eine Färbung von ERK2 durchgeführt (B). Gezeigt ist ein
repräsentativer Versuch.
All diese bisherigen Daten bieten keinerlei Hinweise dafür, dass TLR2 oder TLR4
entscheidend an der Candida-vermittelten NF-κB-abhängigen Genexpression in
HUVEC oder HEK293-Zellen beteiligt sind.
4.5.2 MyD88 und IRAK1 sind entscheidend an der Weiterleitung des Candidainduzierten
Signals in HUVEC beteiligt
Die Signaltransduktion über die meisten Rezeptoren der Toll/IL-1 Rezeptor-
Superfamilie benötigt die Rekrutierung des Adaptermoleküls MyD88 an den Rezeptor
und die anschließende Phosphorylierung der IL-1 Rezeptor-assoziieren Kinase 1
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