Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

Hitze-Inaktivierung auf einer Sabouraud-Glukose-Agar-Platte ausgestrichen, wobei in
Kultur aufgrund der Vorbehandlung keine Lebendkulturen mehr entdeckt werden
konnten (Daten nicht gezeigt). Sowohl lebende Candida-Hefen als auch
Hitze-inaktivierte Candida-Hefen wurden mit einer MOI von 1 zur Stimulation von
HUVEC eingesetzt. Die Auswertung der Zellkulturüberstände nach acht Stunden
mittels ELISA ergab, dass nur die lebenden Candida-Hefezellen in HUVEC eine
CXCL8-Expression induzieren konnten (Abbildung 4.6, links). Das gleiche Ergebnis
wurde in der Western Blot-Analyse von HUVEC beobachtet, die mit lebenden und
Hitze-inaktivierten C. albicans in verschiedenen MOI über acht Stunden co-kultiviert
wurden (Abbildung 4.6, rechts).
In allen Versuchen waren also nur lebende Candida in der Lage, die Expression des
Chemokins in HUVEC zu induzieren.
Abbildung 4.6 Hitze-inaktivierte C. albicans induzieren keine CXCL8-Expression in HUVEC.
HUVEC wurden für acht Stunden mit lebenden oder Hitze-inaktivierten C. albicans (MOI=1)
co-kultiviert. Die Kulturüberstände wurden mittels ELISA auf CXCL8 untersucht. Die gezeigten Werte
und Standardfehler wurden aus drei unabhängigen Versuchen berechnet (links). Für eine Western
Blot-Analyse wurden die mit lebenden und Hitze-inaktivierten C. albicans stimulierten HUVEC nach
acht Stunden Co-Kultur lysiert. Der Blot wurde mit Antiseren gegen CXCL8 und ERK2 gefärbt (rechts).
4.1.6 Die Aktivierung von HUVEC durch C. albicans ist nicht durch eine LPS-
Verunreinigung bedingt
Da bei der Arbeit mit einem Hefepilz wie Candida albicans eine Kontamination mit
anderen Keimen nicht unbedingt sofort auffallen würde, sollte eine Verunreinigung
der Candida-Kultur mit Lipopolysaccharid (LPS), einem Bestandteil von Gramnegativen
Bakterienzellwänden und einem bekanntermaßen sehr starken
Immunogen, ausgeschlossen werden.
Es gibt in der Literatur einige Fälle, die veranschaulichen, dass Verunreinigungen in
verwendeten Präparationen zu missverständlichen Schlussfolgerungen führen
können. Ein Beispiel sind Berichte von 1998, dass Toll-like Rezeptoren 2 (TLR2) die
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