Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

Die deutliche Abhängigkeit der C. albicans-vermittelten, NF-κB-abhängigen
endothelialen Genexpression von MyD88 und IRAK1 lässt auf eine Signalerkennung
durch einen Toll-like Rezeptor schließen. Dieser Rezeptor scheint aber weder TLR2
noch TLR4 zu sein, die beide als beteiligte Rezeptoren an der Erkennung des
Candida-Signals in anderen Modellsystemen beschrieben wurden.
4.6 TLR3 ist an der C. albicans-induzierten CXCL8-Expression in HUVEC
beteiligt
Zur weiteren Klärung der Signalerkennung wurde im Folgenden die mögliche
Beteiligung anderer Rezeptoren untersucht. Es wurden dazu kommerziell erworbene,
validierte siRNA-Oligonukleotide gegen verschiedene Rezeptoren verwendet (TLR3,
TLR4, TLR9, NOD-1). Einen hemmenden Einfluss auf die C. albicans-induzierte
CXCL8-Expression konnte nur bei der Verwendung der siRNA gegen TLR3
beobachtet werden (Daten nicht gezeigt).
Kürzlich wurde von Morris et al. gezeigt, dass TLR3 eine proinflammatorische
Genexpression in Endothelzellen als Antwort auf den etablierten TLR3-Agonisten
Poly(I:C) vermittelt (Morris et al., 2006). Poly(I:C) (Polyinosin-polycytidylsäure) ist ein
synthetisches Analogon einer Doppelstrang-RNA und wurde als spezifischer Ligand
für TLR3 beschrieben. Poly(I:C) wurde daher für die Untersuchung verwendet, ob
unter den vorliegenden Kulturbedingungen funktionelle TLR3 in HUVEC vorhanden
sind. HUVEC wurden für acht Stunden mit verschiedenen Konzentrationen an
Poly(I:C) stimuliert. Als Positivkontrolle wurden HUVEC parallel auch mit IL-1β
stimuliert. Die Totalzelllysate dieser Zellen wurden im Western Blot auf ihren Gehalt
an CXCL8 untersucht, wobei eine konzentrationsabhängige CXCL8-Expression nach
Poly(I:C)-Stimulation beobachtet werden konnte (Abbildung 4.32). Dieses Ergebnis
bestätigt das Vorkommen funktioneller TLR3 in HUVEC.
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