Candida albicans-induzierte Genexpression in primären ... - OPUS

stress-aktivierte Protein-1 Kinase (MSK1) identifiziert, die unterhalb von p38 wirkt.
MSK1 phosphoryliert p65, ein Mitglied der NF-κB/Rel Familie, sowie Komponenten
des Chromatingerüstes, und beeinflusst dadurch die NF-κB-abhängige
Gentranskription (Schmitz et al., 2001; Vermeulen et al., 2003).
Interessanterweise war sowohl die κB- als auch die p38-Aktivierung nach Exposition
mit C. albicans im Vergleich mit dem prototypischen Aktivator der
Chemokinexpression in Endothelzellen, TNFα, deutlich verspätet und länger
anhaltend (Abbildungen 4.11 und 4.19). Diese verzögerte Kinetik lässt auf einen
alternativen, langsameren Aktivierungsweg schließen. Die nahe liegende Vermutung
einer indirekten, autokrinen Aktivierung über Candida-induzierte proinflammatorische
Zytokine oder andere lösliche Faktoren konnte hier ausgeschlossen werden. In einer
Untersuchung von Orozco et al. wurde für die C. albicans-vermittelte Expression von
CXCL8 und des Oberflächenrezeptors E-Selektin ein indirekter Mechanismus über
TNFα postuliert (Orozco et al., 2000). Im Widerspruch zu dieser Studie wurde aber in
der vorliegenden Arbeit klar gezeigt, dass die späte Expression von CXCL8 nach
Stimulation mit C. albicans nicht durch eine autokrine Wirkung der
proinflammatorischen Zytokine TNFα oder IL-1β bedingt ist. Ebenso wie TNFα
aktiviert auch IL-1β den IKK/IκBα/NF-κB-Signalweg innerhalb kürzester Zeit (Otkjaer
et al., 2007; Yan et al., 2006). Weder durch die Zugabe von löslichem TNF-Rezeptor,
noch eines IL-1-Rezeptor-Antagonisten konnte die Candida-induzierte CXCL8-
Expression gehemmt werden. Zudem wurde im Mikroarray keine Induktion von TNFα
beobachtet, wodurch dieses als indirekter κB-Aktivator weiter ausgeschlossen
werden kann. Auch eine indirekte Aktivierung der Endothelzellen über andere
Faktoren oder über lösliche Candida-Produkte konnte durch Versuche mit
konditionierten Medien klar widerlegt werden (Abbildungen 4.17 und 4.18).
Ähnlich verzögerte Aktivierungskinetiken wie mit C. albicans wurden zuvor schon bei
anderen Endothelaktivatoren beobachtet, beispielsweise bei Phorbolmyristatacetat,
Lipopolysaccharid (LPS) oder Nickel (Goebeler et al., 2001; Johnson et al., 1996;
Zen et al., 1998). Als mögliche Erklärung für die verzögerte Reaktion von
Endothelzellen auf eine Infektion mit C. albicans wäre die Notwendigkeit der
Hefe-Hyphe-Transition denkbar, die vom zeitlichen Verlauf gut mit der
Aktivierungskinetik von κB und p38 korreliert. Außerdem wurde beobachtet, dass
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