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de matarlos y provocar en ellos el estiramiento. Si los nematodos se
encuentran en formol al 10%, se realizan varios lavados con solución salina
para eliminarlo. El inconveniente de los nematodos conservados en formol, es
que los especimenes conservan la posición que tenían al estar vivos, por lo
que es común observarlos enroscados, lo que dificulta la medición de los
mismos. El aclarado de los especimenes se hace con lactofenol de Amann,
dejándolos reposar inmersos en él en una caja de Petri, para después colocar
cada ejemplar entre un portaobjetos y un cubreobjetos, evitando dejar
burbujas y luego se procede a identificar (rotular) la laminilla. Este
procedimiento aclara la cutícula del nematodo lo que facilita la observación de
sus estructuras internas. En la práctica se ha observado que las laminillas con
especimenes en lactofenol de Amann, pueden mantenerse por varias
semanas o meses, solo hay que agregar más según sea necesario.
Si se requieren preparaciones permanentes, se procede a llevar a cabo la
técnica de tinción con Hemalumbre de Meyer, que se describe a continuación:
Después de fijar los parásitos con formal al 10% o con alcohol etílico al 70%,
éstos se lavan con agua destilada y se colocan en una caja de petri con papel
filtro, después se adiciona el Hemalumbre de Meyer y se deja a temperatura
ambiente durante 24 a 48 horas; pasado este tiempo se decanta el colorante y
se lavan los especimenes varias veces con agua destilada hasta que ésta no
muestre rastros del colorante. Posteriormente, los parásitos se deshidratan al
pasarlos sucesivamente en alcoholes del 40%, 50%, 60% y 70%, decolorando
luego en alcohol ácido. La deshidratación se continúa utilizando
sucesivamente alcoholes del 80%, 90%, 96% y alcohol absoluto. Cada pase
en cada uno de los diferentes alcoholes dura de 12 a 24 horas. A continuación,
los parásitos se aclaran con xilol fenicado y creosotado durante 20 minutos
para luego montarlos con bálsamo del Canadá, haciendo presión con una
pinza. Finalmente, para secarlos, se colocan en una estufa bacteriológica a 37
°C durante 12 a 24 horas; después se limpian y etiquetan.
b) Cestodos y trematodos
El proceso se inicia con la compresión de los helmintos, lo que se lavan
perfectamente con solución salina fisiológica y se colocan entre dos
portaobjetos, comprimiéndolos utilizando ligas de hule, de manera que cada
ejemplar quede extendido. Después, los helmintos se fijan, para lo cual se
introducen en un recipiente conteniendo formol al 10% y se dejan 24 horas.
Luego se extrae el fijador y se quitan las ligas para montar cada uno en placas
de vidrio y luego se fijan con grenetina. Posteriormente se introducen en un
recipiente con formol al 10%. Si se quiere hacer preparaciones permanentes
de los trematodos, se emplea la técnica de tinción de Hemalumbre de Meyer,
descrita anteriormente
. D. Identificación de nematodos
a) Mammomonogamus spp.
Los miembros de este género (dos especies) pertenecen al órden
Rhabditida, Familia Syngamidae. Mammomonogamus laryngeus se localiza
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