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Las cajas se incuban en cámara húmeda a 37°C durante 30
minutos.
Se elimina el antígeno y cada caja se lava tres veces con agua
destilada.
Secar las cajas con el ventilador, ya están sensibilizadas. Pueden
utilizarse inmediatamente o guardarse en cámara húmeda a 4°C
(máximo una semana) para su uso posterior.
Para la titulación de un suero conocido, se hacen diluciones dobles
empleando solución salina amortiguadora de fosfatos (SSAF) pH
7.2 como diluyente.
Colocar 5 microlitros de cada una de las diluciones en la superficie
de la caja con una separación aproximada de 1 cm entre una y otra
( Figura 14.3.2).
Cuando el número de gotas sea mayor de 10, es
recomendable colocar un rodete de papel humedecido en la
cubierta de la caja, que funcionará como cámara húmeda interna y
evitará que las gotas se sequen.
Incubar en cámara húmeda a 37°C durante 60 minutos.
Retirar las cajas de la cámara, quitar el papel filtro de cada cubierta
y llenar ésta con agua a 60 °C; invertir cada caja sensibilizada
sobre la cubierta, dejándola así por aproximadamente 60
segundos.
Lavar cada caja tres veces con agua destilada y luego secarla
perfectamente con el ventilador.
Llenar nuevamente la cubierta de cada caja con agua a 60°C,
luego invertir la caja sobre la cubierta y dejarla por un tiempo
aproximada de entre 45 a 120 segundos.
14.3.1.2. Interpretación de la prueba
En los sitios donde se colocan los sueros que contiene anticuerpos
específicos contra el antígeno adsorbido en la caja, se observa una
condensación de agua mayor que la que ocurre en el resto de la superficie de
la caja y ésta será inversamente proporcional a la dilución de suero ( Figura
14.3.3). La lectura se hace considerando los siguientes parámetros:
(+) Gotas grandes que llenan la superficie de aplicación del suero.
( -)
Patrón de condensación igual a la superficie donde no se aplicó suero.
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