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Figura 4.1. Técnica de migración larvaria
4.3. Lavado de larvas infectantes (L 3)
de nematodos
gastroentéricos con solución de sacarosa al 40%
Al hacer el coprocultivo para obtener las larvas en la fase infectante éstas se
encuentran muy sucias por lo que es importante que una vez que se
concentren, limpiarlas por medio de la técnica de Baermann. Luego las larvas
se filtran a través de un tamiz de malla 100 con la idea de eliminar detritos.
Posteriormente todo el contenido se pasa a unos tubos de plástico de 50 mL los
que se meten a refrigeración a 4ºC por dos horas y luego se elimina el
sobrenadante y se limpia el sedimento. En tubos de ensaye se colocan nueve
mL de sacarosa al 40% y después con mucho cuidado se agrega el sedimento
con larvas deslizándolas por las paredes del tubo de ensaye para
posteriormente centrifugarlas a 3500 r.p.m. durante cinco minutos con la
finalidad de que sedimente la mayor cantidad de contaminantes;
posteriormente se colectan las larvas (contenidas en el anillo que se forma)
para inmediatamente depositarlas en tubos de 10 mL y lavarlas por
centrifugación con agua destilada para eliminar el exceso de sacarosa. Esta
operación se realiza por tres ocasiones a 3500 r.p.m. durante tres minutos y así
poder utilizarlas en diferentes pruebas experimentales (control biológico e
inmunológico, Biología Molecular, Epidemiología y Ecología).
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