Abrir - Bienvenidos a la Biblioteca del INIFAP - Instituto ...

Cuando se considera que los parásitos de interés son escasos, se realiza un
frotis grueso, en caso contrario se recomienda el frotis delgado.
La elección de los colorantes y métodos de tinción dependerá de la
disponibilidad de los mismos, los más usuales son las soluciones de Giemsa y
Wright.
E.- Frotis
Este procedimiento consiste en extender sobre un portaobjetos una gota
pequeña de sangre en una sola capa, evitando la superposición de células. La
técnica comprende (Houwden 2000):
- Colocar una gota de sangre (2-3 l) en un portaobjetos limpio,
desengrasado y seco.
- Hacer contacto con otro portaobjetos con la gota de sangre.
- Inclinar en un ángulo de 30-45 grados, para que por capilaridad se
extienda en el borde que toca la gota.
- Deslizar de un sólo impulso al portaobjetos inclinado desde el sitio
dónde se coloca la muestra hasta el lado opuesto
- Secar la sangre para lo cual se ondea rápidamente el portaobjetos al
aire en una corriente de aire tibio.
- El secado deficiente ocasiona lisis de los eritrocitos.
- secado deficiente ocasiona lisis de los eritrocitos.
- Aplicar la coloración deseada.
Cuando se considera que los parásitos de interés son escasos, se realiza
un frotis grueso, en caso contrario se recomienda el frotis delgado.
La elección de los colorantes y métodos de tinción dependerá de la
disponibilidad de los mismos, los más usuales son las soluciones de
Giemsa y Wright.
F.- Tinción de Wright (Clark, 1981; Hematology, 1993)
Este colorante es azul de metileno policromado con bicarbonato de sodio y con
agregado de eosina, esta última se combina y resulta un compuesto
precipitado es el colorante de Wright en polvo.
Se emplea en forma concentrada, lo que hace que sea un método rápido. Esta
tinción es recomendable para el trabajo rutinario como es el conteo diferencial
de leucocitos.
La tinción estándar de Wright se prepara con 0.1g de polvo de colorante
disuelto en 60 ml de alcohol metílico libre de acetona y de acido acético. La
solución se coloca en un frasco ámbar y se mantiene en reposo durante 2 a 4
semanas. Se hace pasar por un papel filtro antes de su uso. El añejamiento del
colorante puede ser a 37C.
La tinción comprende:
- Fijar el frotis con alcohol metílico durante 2a3min
- Preparar 4 ml de la solución colorante con 6 ml de agua destilada
- con la mezcla resultante cubrir al frotis
144