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iniciadores específicos del género y especie, de manera que no permiten la detección de B. bigemina y viceversa (Figueroa y Álvarez, 2004). 1.5. Sensibilidad y especificidad epidemiológicas Los conceptos de sensibilidad y especificidad epidemiológicas son particularmente imprescindibles, particularmente son necesarios para estimar la magnitud de enfermedad a nivel de población animal. La sensibilidad diagnóstica o epidemiológica de una prueba se define como la probabilidad de que una prueba sea positiva si la enfermedad está presente; es decir, positivos realmente positivos. Por lo tanto, está más interesada en la detección de la sustancia o agente y no en la capacidad de detección de la concentración o nivel más bajo de la sustancia o analito (Saah et al., 1997). En tanto la especificidad diagnóstica es la capacidad de una prueba para identificar correctamente como negativo a un individuo que no tiene la condición o enfermedad de interés; es decir negativos realmente negativos (Smith, 2005). Es importante considerar que cuando la sensibilidad de una prueba es alta, el número de individuos clasificados como falsos negativos disminuye, considerando a éstos como individuos o muestras con resultado negativo que se sabe pertenecen a enfermos. Pero cuando la especificidad de una técnica es elevada, el número de individuos de falsos positivos será en baja proporción, los cuales, son muestras o individuos con resultado positivo que se sabe son libres de la enfermedad (Hennekens et al., 2007; Smith, 2005). 1.6. Validación de una prueba diagnóstica Antes de hacer uso de cualquier metodología diagnostica es un requisito hacer su validación, proceso que permite ajustarla a un uso muy particular. Al hacer la validación existen criterios que deber considerarse debido a que existen variables que pueden afectar la ejecución del ensayo. Las variables se pueden agrupar en muestra; ensayo y resultado de la prueba. La muestra en sus características puede estar afectada por interacciones del hospedadoragente que modifican concentración, composición. Un ensayo posee características propias asociadas a factores químicos, físicos, biológicos y asociados al técnico laboratorista que afectan la capacidad de la prueba para la detección del analito de interés. Tratando sobre el resultado de la prueba, cada una posee sus propias tasas de sensibilidad, especificidad o valores predictivos, las cuales, podrán predecir con diferente precisión el estatus de la condición o enfermedad (Jacobson, 1996; Smith, 2005). Para que una prueba sea usada de manera regular, esta deberá ser validada. Durante el proceso de validación la sensibilidad y la especificidad diagnósticas son los parámetros primarios que se obtienen de una prueba. Un ensayo o prueba que se ha validado permite identificar animales como positivos o negativos al ser analizados, el tipo de respuestas puede variar dependiendo del tipo de agente. En un ELISA para el diagnóstico de Anaplasma marginale la variable a evaluar regularmente es la detección de anticuerpos (Barigye et al., 2004). En un diagnóstico de PCR de tiempo real a partir de ADN derivado de huevos de Haemonchus contortus se puede estimar el número de huevos (Harmon et al., 2007). También para este tipo de parásitos es posible el uso de 5
técnicas coproparasitocópicas en las que la variable es la detección de huevos en muestras de heces (Muñoz et al., 2008). 1.7. Cálculo de la sensibilidad y especificidad diagnósticas Para el cálculo de la sensibilidad y especificidad diagnósticas se utiliza una tabla de contingencia de 2 x 2, en esta se clasifican los resultados de la prueba utilizada como positivos (PV) o negativos verdaderos (NV), además se incluyen los falsos positivos (FP) y falsos negativos (FN) que puedan resultar. La sensibilidad diagnóstica se calcula de la siguiente manera: positivos verdaderos/positivos verdaderos + falsos negativos (PV/PV+FN) x 100; la especificidad diagnostica se calcula así: negativos verdaderos/falsos positivos + negativos verdaderos (NV/FP+NV) x 100 (Thrusfield, 2004). Una vez que se define el punto de corte de una prueba o la clasificación de negativos o positivos, entonces es posible hacer el cálculo de la sensibilidad y especificidad diagnosticas. Otros de los parámetros con respecto al número de casos detectados por el escrutinio son los valores predictivos, que son medidas que indican si un animal tiene o no la enfermedad o ha sido expuesto, dados los resultados de la prueba con que se analiza la muestra. El valor predictivo positivo VP(+) se define como la probabilidad de que un animal tenga la enfermedad, dado que resulta positivo a la prueba aplicada; esta es calculada como: PV / PV+ FP. Similarmente, el valor predictivo negativo VP (-) se define como la probabilidad de que un individuo sea negativo verdadero a la enfermedad, dado que es negativo a la prueba de escrutinio y se calcula como: NV / FN+NV. Prueba Positivo ( +) Negativo ( - ) Muestras de Animales con status de Infección Conocido Infectado No Infectado (+) (-) a Positivos Verdaderos b Falsos Positivos Sensibilidad = (a / a + c) x 100 Especificidad = (b / b + d) x 100 Precisión = (a + d / a+b+c+d) x 100 Prevalencia = (a + c / a+b+c+d) x 100 Valor predictivo (+) = a / a+b x 100 Valor predictivo (-)=d/c+dx100 a+b c d c+d Falsos Negativos Negativos Verdaderos a + c b + d a+b+c+d Total 6
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